[发明专利]一种控制米根霉生长形态产L‑乳酸的方法有效
申请号: | 201410377353.3 | 申请日: | 2014-08-01 |
公开(公告)号: | CN104131042B | 公开(公告)日: | 2017-05-17 |
发明(设计)人: | 付永前;蒋茹;朱华跃;尹龙飞;孙小龙;李鑫 | 申请(专利权)人: | 台州学院 |
主分类号: | C12P7/56 | 分类号: | C12P7/56;C12R1/845 |
代理公司: | 江苏致邦律师事务所32230 | 代理人: | 徐蓓 |
地址: | 318000 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 控制 米根霉 生长 形态 乳酸 方法 | ||
1.一种控制米根霉生长形态产L-乳酸的方法,发酵步骤依次为:
(a)孢子固体培养基培养(b)一级种子罐培养(c)二级种子罐培养(d)发酵罐培养,发酵罐菌体形态当量直径为0.4-2.2 mm;
其中,一级种子罐培养的培养基配方为:葡萄糖、玉米淀粉、木薯淀粉、玉米糖化醪、纤维素酶解液中的一种或者几种折合葡萄糖含量为1-8%,尿素、硝酸铵、碳酸铵、黄豆饼粉、玉米饼粉、玉米浆、鱼粉或酵母膏中的一种或几种含量为1-5g/L,磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二铵中的一种或几种含量为1-5 g/l;
二级种子罐培养的培养基配方为:葡萄糖、玉米淀粉、木薯淀粉、玉米淀粉糖化醪、纤维素酶解液中的一种或者几种折合葡萄糖含量为1-10%,尿素、硝酸铵、碳酸铵、黄豆饼粉、玉米饼粉、玉米浆、鱼粉或酵母膏中的一种或几种含量为1-2g/L,磷酸氢二钠、磷酸二氢钠、磷酸二氢钾、磷酸氢二钾、磷酸氢二铵中的一种或几种含量为1-3 g/l,
发酵培养的培养基配方为:葡萄糖、玉米淀粉、木薯淀粉、玉米糖化醪、纤维素酶解液中的一种或者几种折合葡萄糖含量为1-20%;
其特征在于:一级种子罐中菌体形态当量直径为0.5-0.8 mm;且二级种子罐菌体形态当量直径为0.5-1.2 mm;
还包括,在一级培养、二级培养、发酵培养培养基中都添加了形态控制剂;
其中,在一级培养中,形态控制剂的添加量为发酵培养基质量的0.5-10%;
在二级培养中,形态控制剂的添加量为发酵培养基质量的0.5-10%;
在发酵培养中,形态控制剂的添加量为发酵培养基质量的0.1-5%;
还包括,制作所述形态控制剂的原料为大豆纤维和麸皮的混合物,其质量比例为大豆纤维:麸皮为1:1-3;且该形态控制剂的制作工艺具体为:物料粉碎为60-80目,按质量比为物料:水分为1:1-2v/w进行混合,按照物料干重的2-10%加入稀硫酸,温度为80-10℃,酸解0.5-2h;酸解后取滤液,加入轻质碳酸钙脱毒剂,且所述轻质碳酸钙的添加量为原料总重的5-10%,调整到pH值大于11,过滤取滤液,灭菌。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述一级种子培养基的配方为,葡萄糖或者玉米淀粉糖化醪折合葡萄糖含量为4-8%,玉米浆含量为1-2g/L,形态控制剂的添加量为2%;
所述二级种子培养基的配方为玉米淀粉糖化醪葡萄糖含量为4-8%,形态控制剂添加量为1%;所述发酵培养基培养为:玉米淀粉糖化醪,形态控制剂添加量为0.1%。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述一级种子培养基的培养条件为37℃,自然pH;所述一级种子罐的培养条件为,通风0.1-1 vvm,搅拌50-200 转/min;所述二级种子罐的培养条件为,通风0.1-0.5 vvm,搅拌50-100 转/min;所述发酵罐培养的培养条件为,通风0.1-0.3 vvm,搅拌50-100 转/min;
其中,一级种子罐培养用于接种二级种子罐培养,接种量为体积比5-20% v/v;
二级种子罐培养用于接种发酵种子罐,接种量为体积比5-20% v/v。
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