[发明专利]一种葡萄糖响应的微管-驱动蛋白运输体系及其制备方法

权利要求书

1.一种葡萄糖响应的微管-驱动蛋白运输体系的制备方法，包括如下步骤：

1)分别制备葡萄糖氧化酶微球或微胶囊、含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液；

2)将所述葡萄糖氧化酶微球或微胶囊分散在含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中，反应，收集沉淀，得到葡萄糖氧化酶微球或微胶囊/ATP合成酶组装体系；

3)将微管、所述葡萄糖氧化酶微球或微胶囊/ATP合成酶组装体系、ADP、磷酸二氢钠、过氧化氢酶和β-巯基乙醇混匀，得到分散液；

4)将酪蛋白水溶液、kinesin水溶液和所述分散液依次加入反应容器中混匀，得到微管-驱动蛋白运输体系。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：

步骤1)中，所述葡萄糖氧化酶微球或微胶囊的粒径为1-4μm；

所述含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中ATP合成酶的终浓度为100-500nM，所述含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中ATP合成酶的终浓度具体为200nM；

步骤3)中，所述微管为罗丹明标记的生物素修饰的微管；

所述葡萄糖氧化酶微球或微胶囊/ATP合成酶组装体系为链霉亲和素修饰的葡萄糖氧化酶微球或微胶囊/ATP合成酶组装体系。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：

步骤2)中，所述葡萄糖氧化酶微球与所述含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中的蛋白脂质体质量配比为10-16：5，所述葡萄糖氧化酶微球与所述含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中的蛋白脂质体质量配比具体为16：5；

或所述葡萄糖氧化酶微胶囊中葡萄糖氧化酶含量与所述含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中的蛋白脂质体质量配比为1：10-25，所述葡萄糖氧化酶微胶囊中葡萄糖氧化酶含量与所述含ATP合成酶的蛋白脂质体溶液中的蛋白脂质体质量配比具体为1：25；

步骤4)中，

所述酪蛋白、所述kinesin、所述微管、所述葡萄糖氧化酶微球/ATP合成酶组装体系、所述ADP、所述磷酸二氢钠、所述过氧化氢酶、所述β-巯基乙醇的配比为0.025mg：1-1.5pmol：1-5μg：50-100μg：0.1-0.5μmol：0.1-0.5μmol：0.01-0.05μg：1-5μg；

所述酪蛋白、所述kinesin、所述微管、所述葡萄糖氧化酶微球/ATP合成酶组装体系、所述ADP、所述磷酸二氢钠、所述过氧化氢酶、所述β-巯基乙醇的配比具体为0.025mg：1.5pmol：5μg：80μg：0.5μmol：0.25μmol：0.04μg：2.5μg；

或所述酪蛋白、所述kinesin、所述微管、所述葡萄糖氧化酶微胶囊/ATP合成酶组装体系、所述ADP、所述磷酸二氢钠、所述过氧化氢酶、所述β-巯基乙醇的配比为0.03mg：1-1.5pmol：1-5μg：1-5μg：0.1-0.5μmol：0.1-0.5μmol：0.01-0.05μg：1-5μg；

所述酪蛋白、所述kinesin、所述微管、所述葡萄糖氧化酶微胶囊/ATP合成酶组装体系、所述ADP、所述磷酸二氢钠、所述过氧化氢酶、所述β-巯基乙醇的配比具体为0.03mg：1.35pmol：5μg：1μg：0.5μmol：0.25μmol：0.04μg：2.5μg；

所述葡萄糖氧化酶微胶囊/ATP合成酶组装体系为链霉亲和素修饰的葡萄糖氧化酶微胶囊/ATP合成酶组装体系。

4.根据权利要求1-3中任一所述的方法，其特征在于：

步骤2)中，所述反应时间为30min；

步骤4)中，所述kinesin水溶液加入时间为待酪蛋白水溶液加入后5min；

所述分散液加入时间为述kinesin水溶液加入后5min。

5.根据权利要求1-4中任一所述的方法，其特征在于：

步骤1)中，所述葡萄糖氧化酶微球或微胶囊为装载聚电解质、蛋白质、多糖或药物的微球或微胶囊。

6.权利要求1-5中任一项所述方法制备的葡萄糖响应的微管-驱动蛋白运输体系。

7.权利要求6所述葡萄糖响应的微管-驱动蛋白运输体系在制备纳米器件中的应用。

8.权利要求6所述葡萄糖响应的微管-驱动蛋白运输体系在作为运输载体中的应用。