[发明专利]嘌呤类物质的制备方法

权利要求书

1.一种具有嘌呤类物质生产能力的细菌，

其为埃希氏菌属(Escherichia)细菌、芽孢杆菌属(Bacillus)细菌或产氨棒杆菌(Corynebacterium ammoniagenes)，且

其已被修饰从而保持突变型yggB基因，

其中，所述突变型yggB基因为具有突变的yggB基因，所述突变使上述细菌的嘌呤类物质的生产能力得到提高。

2.权利要求1中所述的细菌，其中，所述突变选自下列(1)～(3)：

(1)编码野生型YggB蛋白质的第419～533位的氨基酸残基的区域中的突变；

(2)编码野生型YggB蛋白质的跨膜区的区域中的突变；和

(3)上述突变的组合。

3.权利要求2中所述的细菌，其中，所述突变(1)是向编码野生型YggB蛋白质的第419～533位的氨基酸残基的区域中插入碱基序列。

4.权利要求2中所述的细菌，其中，所述突变(1)是将存在于野生型YggB蛋白质的第419～533位的脯氨酸残基替换为其它氨基酸的突变。

5.权利要求2～4中任一项所述的细菌，其中，所述跨膜区选自野生型YggB蛋白质的第1～23位、第25～47位、第62～84位、第86～108位和第110～132位的氨基酸残基。

6.权利要求2～5中任一项所述的细菌，其中，所述突变(2)不伴有移码突变和无义突变。

7.权利要求2～6中任一项所述的细菌，其中，所述突变(2)选自下列(2a)～(2d)：

(2a)在野生型YggB蛋白质的第14位亮氨酸残基和第15位色氨酸残基之间插入一个或多个氨基酸残基的突变；

(2b)将野生型YggB蛋白质的第100位丙氨酸残基替换为其它的氨基酸残基的突变；

(2c)将野生型YggB蛋白质的第111位丙氨酸残基替换为其它的氨基酸残基的突变；和

(2d)上述突变的组合。

8.权利要求7中所述的细菌，其中，在所述第14位亮氨酸残基和第15位色氨酸残基之间插入Cys－Ser－Leu。

9.权利要求7或8中所述的细菌，其中，将所述第100位和/或第111位的丙氨酸残基替换为苏氨酸残基。

10.权利要求1～9中任一项所述的细菌，其中，所述野生型YggB蛋白质是下列(A)或(B)中所述的蛋白质：

(A)具有SEQ ID NO:9,11,13或15所示的氨基酸序列的蛋白质、

(B)具有在SEQ ID NO:9,11,13或15所示的氨基酸序列中，包含替换、缺失、插入或添加一个或多个氨基酸残基的氨基酸序列，且作为力敏感性通道发挥作用的蛋白质。

11.权利要求1～10中任一项所述的细菌，其已被修饰从而使参与嘌呤类物质生物合成的酶的活性增加。

12.权利要求1～11中任一项所述的细菌，其中所述嘌呤类物质选自肌苷、黄苷、鸟苷和腺苷。

13.权利要求1～11中任一项所述的细菌，其中所述嘌呤类物质选自肌苷酸、黄苷酸和鸟苷酸。

14.权利要求1～13中任一项所述的细菌为大肠杆菌。

15.权利要求1～13中任一项所述的细菌，其是枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)或解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。

16.权利要求1～13中任一项所述的细菌为产氨棒杆菌(Corynebacterium ammoniagenes)。

17.一种制备嘌呤类物质的方法，其包括在培养基中培养权利要求1～16中任一项所述的细菌，从而在培养基中积累嘌呤类物质，以及从该培养基中回收所述嘌呤类物质。

18.一种制备嘌呤核苷的方法，其包括在培养基中培养权利要求1～16中任一项所述的细菌，从而在培养基中积累嘌呤核苷，以及从该培养基中回收所述嘌呤核苷。

19.一种制备嘌呤核苷酸的方法，其包括在培养基中培养权利要求1～16中任一项所述的细菌，从而在培养基中积累嘌呤核苷酸，以及从该培养基中回收所述嘌呤核苷酸。

20.一种制备嘌呤核苷酸的方法，其包括在培养基中培养权利要求1～16中任一项所述的细菌，从而在培养基中积累嘌呤核苷，对所述嘌呤核苷进行磷酸化从而生成嘌呤核苷酸，以及回收所述嘌呤核苷酸。