[发明专利]用于对特异性细胞进行筛选的微流控芯片及细胞筛选方法

权利要求书

1.一种用于对特异性细胞进行筛选的微流控芯片，包括基底(21)和附着于所述基底上的腔道(23)，其特征在于，还包括声波激励源；所述腔道包括中间通道、位于所述中间通道一端的用于供靶向微泡和含有特异性细胞的血液注入的入口(231,232)和位于所述中间通道另一端的用于供分离出的特异性细胞和血细胞输出的出口(233,234,235)；所述声波激励源位于基底上且位于所述中间通道的两侧，所述声波激励源包括沿所述中心通道并向出口方向延伸的两部分，其中靠近出口的第二部分对应的声波共振频率是远离出口的第一部分对应的声波共振频率的整数倍。

2.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述声波激励源包括一对叉指换能器(22)，所述叉指换能器位于基底上且位于所述中间通道的两侧，所述叉指换能器包括第一电极部分(221)、第二电极部分(223)和用于连接所述第一电极部分和所述第二电极部分的过滤带(222)，所述第一电极部分对应所述远离出口的第一部分，所述第二电极部分对应所述靠近出口的第二部分。

3.如权利要求2所述的微流控芯片，其特征在于，所述第一电极部分的指条宽度为所述第二电极部分的指条宽度的整数倍。

4.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述基底为128度YX双面抛光的铌酸锂晶体；所述腔道由聚二甲基硅氧烷材质制作；所述入口包括用于供靶向微泡注入的第一入口(231)和用于供血液注入的第二入口(232)，所述出口包括用于供分离出的特异性细胞输出的第三出口(233)、第五出口(235)和用于供血细胞输出的第四出口(234)，且所述第四出口位于所述第三出口和所述第五出口之间。

5.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述声波激励源包括基于体声波的激励源。

6.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述特异性细胞包括循环肿瘤细胞；所述特异性细胞与所述靶向微泡的特异性不同，且所述靶向微泡在声波激励源的作用下粘附于所述特异性细胞。

7.如权利要求1所述的微流控芯片，其特征在于，所述腔道采用软光刻工艺制作。

8.一种用于对特异性细胞进行筛选的方法，其特征在于，包括：

细胞富集步骤：将含有特异性细胞的血液和已制备的靶向微泡注入如权利要求1所述的微流控芯片，当所述血液和所述靶向微泡移动到与所述第一部分相对应的位置时，对所述微流控芯片施加信号以在所述腔道内形成驻波声场，且使得血液中的血细胞以及与靶向微泡充分接触的特异性细胞沿所述中心通道并朝向出口方向移动；

细胞分选步骤：当所述血液和所述靶向微泡移动到与所述第二部分相对应的位置时，调整所述信号的频率或相位，从而使得靶向微泡及与其充分接触的特异性细胞的移动速度大于血细胞的移动速度。

9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述特异性细胞为循环肿瘤细胞；所述靶向微泡的制备包括：

步骤A：在容器中按一定比例将一定量的二硬脂酰磷脂酰胆碱、聚乙二醇2000修饰二硬脂酰磷脂酰乙醇胺溶解在三氯甲烷中且在涡旋混合器上混匀，通入氮气除去三氯甲烷并使磷脂在容器壁上形成一层均匀的薄膜，真空干燥若干小时；

步骤B：在含有干燥磷脂薄膜的容器中加入经脱气处理的三羟甲基氨基甲烷缓冲溶液，所述缓冲溶液含有10％体积的甘油和10％体积的丙二醇，加热所述缓冲溶液到相转变温度以上，水浴超声震荡使磷脂溶液分散彻底直至透明；

步骤C：将透明的磷脂溶液分装置西林瓶中，并将西林瓶中的空气置换为生物惰性气体；

步骤D：震荡西林瓶从而制备出微泡。

10.如权利要求8或9所述的方法，其特征在于，所述微流控芯片的声波激励源为位于基底上且位于所述中间通道的两侧的一对叉指换能器，所述叉指换能器包括第一电极部分、第二电极部分和用于连接所述第一电极部分和所述第二电极部分的过滤带，所述第一电极部分对应的声波共振频率为所述第二电极部分对应的声波共振频率的整数倍。