[发明专利]一种PRRT2蛋白相关的抗原表位肽及其应用

说明书

本发明提供了一种PRRT2蛋白相关的抗原表位肽及其应用，具体的本发明提供了一种抗原表位肽，所述抗原表位肽源自PRRT2蛋白，并且所述抗原表位肽的氨基酸长度为100‑200个氨基酸。实验结果表明，使用该抗原表位肽免疫动物，能够制备出对PRRT2特异性强、灵敏度度高的抗PRRT2抗体。而且该抗体对检测方法的适用性广，可用于western blot分析、细胞免疫荧光检测、组织免疫荧光检测和免疫共沉淀(IP)分析等。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体地说，本发明涉及一种PRRT2蛋白相关的抗原表位肽及其应用。

背景技术

PRRT2(proline-rich transmembrane protein)为富含脯氨酸的跨膜蛋白，在人类已发现了3个PRRT2蛋白亚型(isoform 1、isoform 2和isoform 3)，其编码基因定位于16号染色体上(16p11.2)。最近的研究表明，PRRT2基因突变与运动诱发性运动障碍(PKD)、良性家族性婴儿癫痫症(BFIE)和婴儿惊厥伴发作性手足舞蹈徐动征(ICCA)等多种运动障碍疾病的发病相关，提示PRRT2突变是多种运动障碍疾病共同的致病因素之一。

目前，已经出现了商业化的PRRT2抗体，但这些商品化的抗体基本都只适用于单一的检测方法，如PRRT2的western blot检测，而且其识别抗原的特异性不强。此外，PRRT2基因的突变会导致运动障碍等相关的疾病。现有的商品化PRRT2抗体大多只能检测正常的PRRT2蛋白，不能检测突变的PRRT2蛋白，因此，这类抗体无法用于疾病发病机理研究。

由于没有高质量的同时可以检测正常和突变PRRT2的抗体，人们无法在蛋白水平上系统研究PRRT2在组织中的分布、表达规律、亚细胞定位及其与其他蛋白的相互作用，因而无法揭示PRRT2基因突变导致运动障碍的致病机理。因此，制备灵敏度高、特异性强、同时可检测正常和突变PRRT2的PRRT2抗体是此类运动障碍疾病发病机理研究工作中亟待解决的关键技术问题之一。

发明内容

本发明的目的是提供一种制备PRRT2抗体的技术，通过该技术制备的PRRT2抗体适用于组织、细胞中PRRT2的检测，特别适合针对由PRRT2基因突变导致的人神经系统疾病的致病机理的研究。

本发明的第一方面，提供了一种抗原表位肽，所述抗原表位肽源自PRRT2蛋白，并且所述抗原表位肽的氨基酸长度为100-200个氨基酸。

在另一优选例中，所述的抗原表位肽的氨基酸序列选自下组：

(A)具有SEQ ID NO:4或6所示氨基酸序列的多肽；

(B)具有与SEQ ID NO:4或6中任一所示氨基酸序列≥80％同源性(优选地，≥90％的同源性；等优选地≥95％的同源性；最优选地，≥97％的同源性)的多肽，且所述多肽具有与抗PRRT2蛋白抗体的结合能力；

(C)将SEQ ID NO:4或6中任一所示氨基酸序列经过1-5个氨基酸残基的取代、缺失或添加而形成的，且保留与抗PRRT2蛋白抗体的结合能力的衍生多肽。

在另一优选例中，所述PRRT2蛋白为哺乳动物的PRRT2蛋白(包括人)。

本发明的第二方面，提供了一种融合蛋白，所述融合蛋白含有本发明第一方面所述的抗原肽和任选的标签序列。

在另一优选例中，所述标签序列选自：GST标签序列、FLAG标签序列、HIS标签序列、MYC标签序列。

本发明的第三方面，提供了一种抗体，所述抗体特异性的结合本发明第一方面所述的抗原表位肽或本发明第二方面所述的融合蛋白，并且所述抗体能够特异性地结合天然的PRRT2蛋白和突变的PRRT2蛋白。

在另一优选例中，所述天然的PRRT2蛋白氨基酸序列如SEQ ID NO.:1所示。