[发明专利]具有改进的特异性的新型免疫球蛋白结合蛋白

权利要求书

1.一种分离的免疫球蛋白结合蛋白，包含一个或多个分离的葡萄球菌(Staphyloccocus)蛋白A的E、D、A、B、C或Z结构域，所述一种或多种分离的结构域中包括：(i)当所述结构域为E、D、A、B或C结构域时，至少第29位的甘氨酸残基被替换为除丙氨酸或色氨酸外的氨基酸残基；或(ii)当结构域为Z结构域时，至少第29位的丙氨酸被替换为除甘氨酸或色氨酸外的氨基酸，其中免疫球蛋白结合蛋白与免疫球蛋白的Fc部分结合，而相对于第29位处包括丙氨酸或者甘氨酸的免疫球蛋白结合蛋白表现出对免疫球蛋白Fab部分的降低的结合。

2.权利要求1中的免疫球蛋白结合蛋白，其中除丙氨酸、甘氨酸或色氨酸外的氨基酸选自由下列氨基酸组成的组：亮氨酸，赖氨酸和精氨酸。

3.权利要求1中的免疫球蛋白结合蛋白，其中至少第29位的甘氨酸残基被替换为除丙氨酸、色氨酸和苏氨酸以外的氨基酸残基，或至少第29位的丙氨酸被替换为除甘氨酸、色氨酸和苏氨酸以外的氨基酸。

4.权利要求1中的免疫球蛋白结合蛋白，其中至少第29位的甘氨酸残基或第29位的丙氨酸被替换为选自由下列氨基酸组成的组的氨基酸：赖氨酸、精氨酸、亮氨酸、半胱氨酸、天冬氨酸、谷氨酸、苯丙氨酸、组氨酸、异亮氨酸、甲硫氨酸、天冬酰胺、脯氨酸、谷氨酰胺、丝氨酸、缬氨酸和酪氨酸。

5.权利要求1中的分离的免疫球蛋白结合蛋白，进一步包含葡萄球菌(Staphylococcus)蛋白A的羧基端结构域的至少一部分。

6.一种层析基质，包含偶联于固体载体的权利要求1所述的分离的免疫球蛋白结合蛋白。

7.一种多肽文库，包含权利要求1所述的免疫球蛋白结合蛋白。

8.权利要求1中的免疫球蛋白结合蛋白，进一步包含在一个或多个分离的结构域中用其它氨基酸残基对天冬酰胺的替换。

9.权利要求8中的免疫球蛋白结合蛋白，其中天冬酰胺在第23位。

10.权利要求1中的免疫球蛋白结合蛋白，其中所述的免疫球蛋白是IgG或其片段。

11.一种核酸分子，其编码权利要求1所述的免疫球蛋白结合蛋白。

12.一种宿主细胞，其包含权利要求11所述的核酸分子。

13.一种从样品中亲和纯化一种或多种免疫球蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供包含一种或多种免疫球蛋白的样品；

(b)在使得所述的一种或多种免疫球蛋白与权利要求6的基质结合的条件下使样品接触所述基质；和

(c)通过在适宜的条件下进行洗脱，回收所述的一种或多种结合的免疫球蛋白。

14.一种分离的免疫球蛋白结合蛋白，包含一个或多个分离的葡萄球菌蛋白A的E、D、A、B、C或Z结构域，其中一个或多个分离的结构域包括：(i)当所述结构域是E、D、A、B或C结构域时，至少第29位的甘氨酸残基被替换为除丙氨酸以外的氨基酸残基；或(ii)当所述结构域是Z结构域的时候，至少第29位的丙氨酸残基被替换为除甘氨酸外的氨基酸残基，其中免疫球蛋白结合蛋白与免疫球蛋白的Fc部分结合，且相对于第29位包括丙氨酸的免疫球蛋白结合蛋白表现出对免疫球蛋白的Fab部分增加的结合。

15.权利要求14中的分离的免疫球蛋白结合蛋白，其中至少第29位的甘氨酸或第29位的丙氨酸被替换为苏氨酸或色氨酸。

16.一种层析基质，包括偶联于固体载体的权利要求14所述的分离的免疫球蛋白结合蛋白。

17.一种从样品中亲和纯化一种或多种免疫球蛋白的方法，该方法包括以下步骤：

(a)提供包括一种或多种免疫球蛋白的样品；

(b)在使得所述的一种或多种免疫球蛋白与权利要求16的基质结合的条件下使样品接触所述基质；和

(c)通过在适宜的条件下进行洗脱，回收所述一种或多种结合的免疫球蛋白。

18.权利要求14中的免疫球蛋白结合蛋白，其中所述免疫球蛋白选自由IgG、IgA或IgM、或它们的片段所组成的组。

19.权利要求1中的免疫球蛋白结合蛋白，其中所述免疫球蛋白的Fc部分是Fc融合蛋白的一部分。