[发明专利]AMZ1基因在制备诊断试剂盒中的用途有效
| 申请号： | 201410389636.X | 申请日： | 2014-08-08 |
| 公开（公告）号： | CN104131103A | 公开（公告）日： | 2014-11-05 |
| 发明（设计）人： | 肖文华;屈雪玲;王硕;李小梅;董伟伟;赵慧霞 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军总医院第一附属医院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 北京中誉威圣知识产权代理有限公司 11279 | 代理人： | 丛芳 |
| 地址： | 100048*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | amz1 基因 制备 诊断 试剂盒 中的 用途 | ||
1.AMZ1基因在制备结肠癌诊断试剂盒中的用途，其特征在于，所述诊断试剂盒包含SYBR Green聚合酶链式反应体系、用于扩增AMZ1基因和管家基因的引物对；所述SYBR Green聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
2.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述扩增AMZ1基因的引物对的序列如下：正向引物序列为5’-AAGAACAACAAGCCAGGGGACG-3’，反向引物序列为5’-CTGGAAGGAACTTGCTGAAGGTGA-3’；所述管家基因是GAPDH，扩增GAPDH基因的正向引物序列为5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’，反向引物序列为5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。
3.根据权利要求1所述的用途，其特征在于，所述PCR缓冲液包含：25mM KCL、2.5mM MgCL2、200mM(NH4)2SO4。
4.根据权利要求1-3中任一项所述的用途，其特征在于，所述诊断试剂盒还包含M-MLV逆转录体系或RNA提取试剂；所述逆转录体系包含T重复寡核苷酸Oligo dT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs；所述RNA提取试剂包含Trizol、氯仿、异丙醇、75％乙醇。
5.根据权利要求4所述的用途，其特征在于，所述逆转录反应液包含：250mM PH8.3的Tris-HCL、375mM的KCL、15mM的MgCL2、50mM的DTT。
6.一种结肠癌的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒包含SYBR Green聚合酶链式反应体系、用于扩增AMZ1基因和管家基因的引物对；所述SYBR Green聚合酶链式反应体系包含：PCR缓冲液、dNTPs、SYBR Green荧光染料。
7.根据权利要求6所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述扩增AMZ1基因的引物对的序列如下：正向引物序列为5’-AAGAACAACAAGCCAGGGGACG-3’，反向引物序列为5’-CTGGAAGGAACTTGCTGAAGGTGA-3’；所述管家基因是GAPDH，扩增GAPDH基因的正向引物序列为5’-TTTAACTCTGGTAAAGTGGATAT-3’，反向引物序列为5’-GGTGGAATCATATTGGAACA-3’。
8.根据权利要求6所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述PCR缓冲液包含：25mM KCL、2.5mM MgCL2、200mM(NH4)2SO4。
9.根据权利要求6-8中任一项所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述诊断试剂盒还包含M-MLV逆转录体系或RNA提取试剂；所述逆转录体系包含T重复寡核苷酸Oligo dT、逆转录反应液、M-MLV逆转录酶、RNA酶抑制剂、dNTPs；所述RNA提取试剂包含Trizol、氯仿、异丙醇、75％乙醇。
10.根据权利要求9所述的诊断试剂盒，其特征在于，所述逆转录反应液包含：250mM PH8.3的Tris-HCL、375mM的KCL、15mM的MgCL2、50mM的DTT。
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