[发明专利]一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法

说明书

 

技术领域    

本发明涉及一种组织培养繁殖紫山药种苗的方法，属植物无性繁殖技术领域。

背景技术    

紫山药(Purple yam)别名薯蓣或脚板薯，长芋。为薯蓣科（Dioscoreaceae）薯蓣属(Dioscorea)的一个地方品种，为多年生蔓性植物，块根呈块状或圆柱状表皮和肉质呈紫红色而得名。紫山药因肥大的块根肉质细腻滑爽,口感极佳,富含粘性蛋白,紫色花青素,维生素和胆碱等，并富含薯蓣皂(天然的DHEA)，内含各种荷尔蒙基本物质,常吃有促进内分泌荷尔蒙的合成作用等多种独特的食疗价值也称紫人参， 据本草纲目药书的记载，经常食用紫山药,不仅可以增加人体的抵抗力，降低血压、血糖、抗衰益寿等功效,，而且还有固肾、润肺益精、软化血管等药用滋补功能。故又被称做蔬菜之王之美誉。

紫山药是无性繁殖的植物。由于长期的块茎繁殖，导致种性退化，品质下降，产量降低。随着农药化肥的大量施用，病毒病不但得不到控制，而且更加严重至蔓延，危及到整个产业以致某些优良品种濒临灭绝。在山药生长初期,病毒病症状并不明显。在生长的中后期,症状逐渐明显,发病初期叶上出现明显的褪绿斑,随后绿色花斑逐渐隆起,叶片斑驳花叶、凸凹卷曲畸形、黄化或坏死,感病叶片明显小于健壮叶片,严重时整株矮化,生长缓慢,地下块茎明显小于健壮的植株,并且畸形,产量下降。不但满足不了市场的供求,还严重影响和制约了地方产业的发展和种植极积性。据资料表明并且证实了病毒病是造成山药产量下降，品质退化的重要因素。由于病毒在寄主植物体内随维管系统转移，而在细胞与细胞之间，病毒可通过胞间连丝扩散转移，因此，一旦感染植物病毒往往蔓延全株，对寄主植物可造成 灭性危害。导致大幅度减产，甚至全株死亡，病毒侵入植物体内，改变了细胞的代谢途径，使正常的生理机能受到于扰和破坏，造成种性退化，抗性降低，生长受阻或出现变色、坏死、畸形，产量降低，品种变劣，甚至完全丧失商品价值。

为保证该物种遗传物质的稳定性，只有通过植物组织培养技术，采用植物营养体进行快速繁殖，才可保持原品种全部的遗传性，实现该品种种质的一致性。据资料显示通过人工脱毒无性繁殖的惠楼山药要比一般山药增产30%以上。因此选育良种，改良品质，增加产量已是当前生产上必需亟待解决的主要问题。

目前尚无有效的药物可防治愈病毒病的发生或蔓延，而采用现代生物技术选取优良无病株种苗进行离体脱毒培养，繁殖无毒或少毒苗，以组培苗更替传统的营养繁殖才能从根本上解决病毒病的问题。

发明内容    

本发明的目的是，根据紫山药块茎繁殖存在的问题，本发明公开一种地方紫色山药（薯）的茎尖组织培养快繁种苗的方法。

本发明的技术方案是，本发明方法以紫山药嫩茎尖（1cm）为外植体，在对外植体用75％酒精和0.1％氯化汞溶液进行消毒灭菌后，接种于初始培养基MS0，待茎尖成活后，取再生芽茎尖（0.5－1.0mm）接种，根据不同时期需要采用不同的培养基配方分别进行茎尖诱导培养、茎尖继代增殖培养和生根培养获得紫山药瓶苗。其中茎尖诱导增殖培养基MS+6BA0.5mg·L^-1 NAA0.1 mg·L^-1 ，生根培养基：1/2MS ＋NAA0.2mg·L^-1 ＋Ac0.2g·L^-1；以上培养基含45g·L^-1食用糖，琼脂6g·L^-1，PH5.7。待苗高2cm左右时再将瓶苗移栽营养钵基质炼苗，培育50－60天苗生长10cm即为紫山药种苗。

本发明方法中的营养钵基质炼苗；基质为黄土和珍珠岩，或泥碳和珍珠岩；黄土与珍珠岩石的体积比为2：3；泥碳与珍珠岩的体积比为3：2；炼苗50－60天，苗高10cm以上即为紫山药种苗。

本发明的有益效果是，本发明催芽方式简便，萌芽速度快；本发明脱毒方试简捷，脱毒率高；品种优纯，接种有效率、诱导率高，芽苗生长快，遗传性稳定等特点；以嫩茎尖接种在初始培养基，再切取再生芽茎尖0.5-1mm接种诱导分化培养基。该方法具有脱毒效果。本发明改进了组织培养程序，每20天为培养物继代周期，增殖和壮苗交替继代培养，培养基附加外源物质后呈多芽体量增株壮，减少褐化富集。本发明方法省略诱导生根环节一步成苗，15天生根可用于移栽。所述培养方式的改进可以减少培养基褐化深度，延长培养物生长周期。本发明方法可实现紫山药组培苗工厂化生产，有利新品种及品种改良的推广。

具体实施方式