[发明专利]鼓槌石斛种苗商品化生产方法

说明书

技术领域

本发明涉及食药观植物鼓槌石斛种苗商品化生产方法，属于植物生物技术领域。

背景技术

鼓槌石斛(Dendrobium chrysotoxum)为兰科石斛属多年生附生草本植物，别名金弓石斛，是一种集食、药、观赏为一身石斛种类，鼓槌石斛花呈金黄色，茎呈纺锤形，观赏价值极高，既可作切花和盆栽观赏，花又可开发系列鼓槌石斛茶、酒、鲜花饼等产品，鼓槌石斛花资源丰富，据报道含有22个化合物，具有美容明目、安神补血、抗癌解郁、降三高等功效；其茎可药用，具有清热解毒，增强免疫力等功效，由于鼓槌石斛资源花的差异大而颜色多，以唇瓣中心斑块颜色为紫红色最艳丽，茎的长短、粗细差异大而形态多，以中杆茎粗的品质及观赏最佳；近年来，人们过渡采挖，加上自然条件下种子萌发率极低，导致野生资源濒临枯竭，那么选择优良鼓槌石斛进行人工杂交授粉选育出新品种，进行组培快繁育苗，为鼓槌石斛规模化种植提供大量优质种苗，解决市场上原料紧缺，加快创新育种的进程，对其资源的保护及开发利用具有深远的意义。

近年来，有关鼓槌石斛组培繁殖有一些报道，通过组织培养试验也获得一定的组培苗，但在石斛规模化生产技术上，培育的种苗根细而少，种胚萌发率低75％，污染率高达10％，种苗繁殖周期长(8个月以上)，种苗生产成本高达1.2元/丛，因此，开展鼓槌石斛有性系的组培繁育研究，提高鼓槌石斛种苗商品化生产技术，还存在以下问题：

1、由于鼓槌石斛种质资源性状上差异较大，而在产量上遗传性比较稳定，茎、叶、花的生长差异明显，鼓槌石斛自然结果，在光照和水肥不足，果荚发育小而不好，品种的纯度性低，导致萌发率低、增殖速度慢、种苗质量差。

2、目前，鼓槌石斛种苗主要是采用分株繁殖，原材料浪费大，发芽率低，难以满足市场需求；而鼓槌石斛现有的组培技术，是以自然结果的果荚为外植体，种胚萌发率低、种苗生产速度慢、苗黄化严重、增殖倍数低等问题使种苗生产速度慢、生根苗质量差、炼苗和移栽成活率低、生长慢，极大的影响了鼓槌石斛种苗商品化生产的规模和速度。

加快鼓槌石斛种苗商品化生产速度，降低成本，提高移栽成活率、鲜花产量、增加花观赏价值及有效成份含量是急需解决的问题。

发明内容

本发明的目的是提供一种鼓槌石斛人工有性杂交授粉育种，培育良种，种苗商品化生产速度快、生产成本低、自然光炼苗和假植培育成活率高、出圃率高的种苗商品化生产方法。

鼓槌石斛种苗商品化生产方法，包括以下方法步骤：

良种选育方法：

(1)优良母株选择：

鼓槌石斛的盛花期为4～5月，选择生长健壮花期长、花朵大而艳丽、植株形态美观、有效成分高的优良母株进行种内人工杂交异株异花授粉；

(2)杂交授粉方法：

①工具：直径6cm培养皿一套，7cm小镊子1把，75％酒精和棉球，套袋，标签；

②授粉方法：一般在早上10点以前，镊子用75％酒精消毒后，将花药取出放在培养皿中，再用镊子去掉母本上花朵的药帽，将父本的花药小心放入母本花朵的柱头窝内，每授一朵花，镊子、培养皿用75％酒精消毒后才能再使用，每穗花穗授粉5～8朵，授完粉后，用白色无纺布做成口袋套上，挂上标签，2～3天之内不能浇水，加强大田管理，保证充足阳光，提高果实的质量，一般经过150～180天果实成熟。

基本母液采用改良的MS(无水氯化钙、铁盐浓度减半、肌醇不用)为Ma的制备方法：大量元素配成50倍液(用量20毫克/升)，微量元素配成200倍液(用量5毫克/升)，植物激素配成50倍液，所有药剂用纯净水溶解定容，微量元素用低温保存，母液保存不要超过一个月。

培养基的配制方法：按培养基的配方要求，称取去皮的马铃薯或香蕉，按马铃薯或香蕉∶水(体积比)＝1∶3，用果汁机打碎成泥加入定容桶内，量取母液和激素、称取琼脂和白糖，按琼脂粉+白糖∶母液+水(混合，体积比)＝1∶5，用木棍边搅边加热至沸腾加入定容桶内，用纯净水定容，充分混合均匀，用1摩尔的NaOH(氢氧化钠)和HCl(盐酸)溶液调PH值5.8-6.0，将培养液倒入不锈钢桶内放在恒温磁力搅拌器(900～1000r/min)不停搅拌，用塑料杯趁热分装，分装标准：小瓶18～20瓶/L，大瓶9～10瓶/L；培养基厚度：小瓶1.4～1.6cm，大瓶2.0～2.2cm，在123～125℃高温下灭菌20分钟，出锅时拧紧瓶盖，标签注明培养基编号、日期，放置3天后备用。

瓶苗培育：

(1)外植体选择与消毒：