[发明专利]一种紫花苜蓿绿肥增效的生物添加剂制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种农业技术领域的绿肥增效剂，具体地，涉及一种紫花苜蓿绿肥增效的生物添加剂制备方法。

背景技术

磷对农作物生长发育具有重要的促进作用,是农作物生长发育的重要营养元素之一，但是土壤中的大部分有机磷和无机磷不能直接被农作物吸收利用，与土壤中的Ca²⁺、Fe³⁺、Al³⁺等离子结合，形成难溶性磷酸盐，固定在土壤中，从而导致土壤中的磷元素利用效率下降，影响农作物产量。绿肥是改良农田，提高农田土壤有机质，减少化肥使用，增加作物产量的有效农艺措施，在农业面源污染日益严重的今天，利用绿肥部分替代化肥已经受到广泛的重视。紫花苜蓿是近年来我国南方引进的优质牧草新品种，现已被逐渐开发成为新型的绿肥植物，鲜草产量高、品质好，改良土壤效果显著。

目前，有关紫花苜蓿作为绿肥在我国南方应用的报道非常少，而有关促进紫花苜蓿绿肥增加作物产量的研究尚未见报道。经对现有技术的文献检索发现，赵鲁等(2012)在《草业学报》第29卷7期(1142-1147页)报道了紫花苜蓿绿肥具有明显改良稻田土壤，促进水稻生长和增加产量的作用；李海云等(2013)在《生物学通报》第48卷7期(1-5页)的综述文章中报道了土壤溶磷微生物的类型和作用，提出土壤溶磷微生物能够提高土壤中固化磷的释放，但针对如何促进绿肥中有机磷转化为无机磷，提高绿肥增产的措施研究尚未涉及。稻田长期处于水淹状态，绿肥分解相对缓慢，绿肥有机磷的释放是制约绿肥增效的关键，目前尚未发现一种能够有效促进稻田绿肥有机磷释放，增加水稻产量的技术措施。

发明内容

针对现有技术存在的上述不足，本发明的目的在于提供一种紫花苜蓿绿肥增效的生物添加剂制备方法，通过本发明方法制备的生物添加剂能够有效促进紫花苜蓿绿肥中有机磷的分解和土壤有机磷的释放，增加水稻对磷的吸收，从而增加水稻产量。

为实现以上目的，本发明提供一种紫花苜蓿绿肥增效的生物添加剂制备方法，所述生物添加剂由微生物菌剂、紫花苜蓿浆糖液和清水混合、发酵而成，每升生物添加剂含保存有微生物菌剂的液体培养基10-30ml、紫花苜蓿浆糖液200-400ml，清水为余量，其中：所述的微生物菌剂由巨大芽孢杆菌(Bacillus megaterium)和蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)组成；

所述的生物添加剂制备方法包括如下步骤：

步骤1)微生物菌剂的制备

将巨大芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌接种在液体培养基中培养与活化，形成所述的微生物菌剂；

步骤2)紫花苜蓿浆糖液的制备

(1)分别称取新鲜的全株紫花苜蓿和蔗糖；

(2)将蔗糖溶解在清水中得到蔗糖溶液；

(3)将所述全株紫花苜蓿和所述蔗糖溶液充分混合，捣碎，用清水定容至1升，制成所述的紫花苜蓿浆糖液；

步骤3)生物添加剂的制备

分别取所述微生物菌剂和所述紫花苜蓿浆糖液，将其按比例混合，用清水定容到1L，28-30℃放置24小时，双层纱布过滤，并用清水定容到1L，形成所述的紫花苜蓿绿肥增效的生物添加剂。

优选地，所述的步骤1)，具体为：

将巨大芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌接种在液体培养基中培养与活化，温度28-30℃，125r.min^-1振动培养48-72小时，形成所述的微生物菌剂。

更优选地，所述微生物菌剂保存在液体培养基中，每ml所述液体培养基中含有的巨大芽孢杆菌和蜡状芽孢杆菌合计不少于10⁸cfu。

所述液体培养基优选MRS液体培养基。更优选地，所述的MRS液体培养基(g/L)配方为：蛋白胨1g，牛肉膏1g，酵母膏0.5g，K₂HPO₄0.2g，柠檬酸二铵0.2g,乙酸钠0.5g，葡萄糖2g，土温800.1％，MgSO₄.7H₂O0.058g，MnSO₄.4H₂O0.025g，琼脂1.5g，pH＝6.2，121℃灭菌15min。

优选地，所述的步骤2)，具体为：

(1)称取300g新鲜的全株紫花苜蓿为原材料，并切碎，其中所述全株紫花苜蓿包括紫花苜蓿的枝叶和根；

(2)按紫花苜蓿：蔗糖＝100：5的重量比称取蔗糖或相当蔗糖量的糖浆；

(3)按紫花苜蓿(g)和水(ml)＝1：2的比例量取清水；