[发明专利]一种不含苯的组织脱蜡透明剂

说明书

技术领域

本发明涉及一种用于生物组织学，组织病理学，法医学的不含苯的组织脱蜡透明剂, 是一种体外诊断试剂，具体涉及既可以使组织透明、又可以使组织脱蜡的制剂。属体外诊断试剂技术领域。 

背景技术

临床实验室在临床医学中发挥着越来越重要的作用，临床实验室提供的诊断信息涉及诊断、治疗、健康状况评估、公共卫生突发事件、科学研究各方面。占患者全部诊断、疗效等医疗信息的60%以上。 

组织病理学的诞生已有150多年的历史。组织石蜡切片是在观察组织形态和免疫组化等定性分析中最常用的一种切片技术，广泛应用于临床病理诊断和实验研究。组织经固定、脱水后，必须经过一种既能与乙醇相混合，又能溶解石蜡的溶剂，通过其媒介作用，使石蜡浸入组织块。在此过程中组织中的水分被溶剂取代，其折射指数接近组织蛋白的折射指数，组织块变得透明。组织经石蜡包埋后制成蜡块，用切片机制成切片后，需要将切片中的蜡脱去，才能进行染色。在透明和脱蜡这两个程序中，使用最多的脱蜡透明剂仍在沿用100多年前使用的二甲苯、苯、甲苯。 

苯、甲苯、二甲苯属于有毒有害化学品，会损伤肝、肾、骨髓和中枢神经系统。具有潜在的致癌性。长期接触二甲苯对人体机能会产生严重的影响，且二甲苯的排放也会对环境造成严重污染。实验和临床研究都表明吸入二甲苯蒸汽会导致头痛、头晕、恶心和呕吐。医院病理科大量使用二甲苯，会对医生和实验室人员的身体造成伤害。 

       二甲苯的的替代品用于人体组织标本石蜡切片脱蜡和透明多年来一直是研究的对象。 

       使用松节油作为透明剂是P.Mayer1910年提出的，由于其挥发慢，使透明后封片的时间延长。松节油还会导致银染色的褪色。含松节油的透明剂在国外已上市多年，如Baxter公司的AmeriClear。中国发明专利（ZL91108571.8；CN200910050030.2 和CN201110023746.0）配方中皆使用松节油作为组织染色后透明。这些透明剂只有透明作用，无脱蜡作用。 

       柠檬烯用于脱蜡始于1981年，但柠檬烯是油性的；对某些个体可能会引起极为严重的过敏反应。美国专利（USP7,070,951)， 就是采用醇类与柠檬烯的混合物，辅以表面活性剂脱蜡。醇类本身脱蜡效果很差，会造成组织过度脱水，使标本发收缩、硬化、脆裂。 

亦有用短链烷烃或支链烷烃做脱蜡剂， 如中国专利ZL00122030.6，用的是航空煤油和石油醚（航空煤油和石油醚都是短链烷烃的混合物）。短链烷烃的缺点是气味强烈，沸点低，在环境中迅速弥散，使用者难于接受。航空煤油含有不会挥发的多种添加剂，如四乙基铅，碱性酚，二壬基萘磺酸等，这些添加剂对组织的影响尚待认识。 

目前Merck 公司在国际市场上销售一种用于组织透明的二甲苯替代品，商品名为NEO-CLEAR(R) XYLENE SUBSTITUTE。其成分是一种工业用油漆稀释剂（bromohexanol acetate），气味强烈，有致癌性。对人体和环境均可能造成危害。因此不是理想的二甲苯替代品。 

为使组织达到最佳的透明效果，透明剂的折射指数应尽可能与组织蛋白的折射指数接近。动物组织的折射指数为1.418，而二甲苯的折射指数为1.49，苯、甲苯的折射指数为1.50，并不能达到最佳的透明效果。目前未見既可以使组织透明、又可以脱蜡，完全取代苯类制剂达到最佳效果的产品。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种不含苯，甲苯，二甲苯的生物组织（包括人体组织、动物、植物、昆虫、微生物及其它标本）的脱蜡、透明剂。可以用于石蜡切片脱蜡，也可用于组织固定后透明，和染色后封片前透明。 

实现本发明不含苯的组织脱蜡透明剂采用的具体技术方案：脱蜡透明剂主要含有95%－100%脂环烃，余量为辅料，所述的脂环烃为单环脂环烃或二环脂环烃。 

所述辅料为表面活性剂、植物精油及抗氧化剂中的一种或多种；其中表面活性剂浓度为0.0%－0.1%、植物精油浓度为0.0%－5.0%，抗氧化剂浓度为0.01%－0.05％。 

脱蜡透明剂中可以加入抗氧化剂，让染色的组织透明后长期保持颜色。 

所述脂环烃中的单环脂环烃或二环脂环烃为环戊烷、环已烷、环庚烷、环辛烷、甲基环己烷，二甲基环己烷，二环己烷中的一种或者多种。 

所述的单环脂环烃为环己烷，甲基环己烷；所述的二环脂环烃为二环己烷。 

所述表面活性剂为阳离子表面活性剂、阴离子表面活性剂、非离子表面活性剂或者双性离子表面活性剂中的一种或者多种。