[发明专利]一种应用凡纳滨对虾仔虾测试杀生物活性物质急性毒性的方法

权利要求书

1.一种应用凡纳滨对虾仔虾测试杀生物活性物质急性毒性的方法，其特征在于，包括以下步骤：

受试生物：健康的、活力好的、出生小于10天的凡纳滨对虾仔虾经驯养后作为受试生物用于受试；

试验用水：采用取自清洁无污染海区水质稳定的海水或人工配制海水作为试验用水；

将受试物用试验用水稀释成不同的梯度浓度，然后再加入受试的凡纳滨对虾仔虾，试验期间不更换试验溶液或者试验期间定时更换新的试验溶液，试验环境条件为：光照周期为12h光照/12h黑暗，15～30min的过渡转换期；温度范围为23～30℃，温度变换范围不超过2℃，盐度为8～28‰；盐度变化范围不超过2‰；pH为7.6～8.6，变化范围不超过0.4；溶解氧含量不低于空气饱和浓度的60％，试验期间仔虾正常喂食；

试验开始后，定时测量受试仔虾的死亡率，计算累积死亡率，以评估受试物的急性毒性。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的仔虾来源于同一批大小一致的自繁饲养或购买的仔虾，当为自繁饲养的仔虾时，需驯养24h后才可用于受试，当为购买的仔虾时，需驯养48h才可用于受试，驯养阶段仔虾的死亡率应小于10％才可用于受试；所述的将受试物用试验用水稀释成不同的梯度浓度是以96h使仔虾全部死亡的最低浓度和对虾全部存活的最高浓度之间进行设置至少5个梯度浓度，浓度间隔系数≤2；所述的试验期间定时更换新的试验溶液，是每隔24h或48h更换一次新的试验溶液，试验周期为96h；所述的试验期间仔虾正常喂食是每天饲喂对虾片或卤虫无节幼体；观察和记录各试验组在试验开始后3h、24h、48h、72h和96h试验对虾的任何可见的异常行为和死亡的数量，并及时取出死虾，并计算试验开始后24h、48h、72h和96h试验对虾仔虾的累积死亡率；采用概率法或修正的斯皮尔曼-卡伯分析方法评估受试物对凡纳滨对虾仔虾的24h、48h、72h和96h LC₅₀值以及其95％的置信限，评估受试物的急性毒性。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，采用取自清洁无污染海区水质稳定的海水或人工配制海水，其盐度：20‰～35‰，pH：7.6～8.6。