[发明专利]盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞M受体影响的评价方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞M受体影响的评价方法。

背景技术

痛经是妇科最常见的症状之一，共同的表现是在经期前后或行经期间，出现下腹部痉挛性疼痛，并有全身不适。由于发生率较高，特别在女性青春期约为45.3％-80％，严重影响女性日常生活。痛经的病因并不完全清楚，虽然按生殖器官有无明显病变可分为原发性和继发性，但是二者共同的机制之一是子宫平滑肌过强收缩而引起，而子宫是一个复杂的器官，存在多种调控子宫活性的途径，如前列腺素受体、缩宫素受体、血管加压素受体、H1受体、5-HT受体、M受体、α、β受体及Ca离子通道等。因此研究这些途径之间的关系必然有助于揭示痛经的发病机制，并为彻底治疗痛经提供可能。

阿托品是治疗痛经的一个常用抗胆碱药物，但是由于其对胆碱受体缺乏选择性，副反应较多，因此开发新的选择性更高的抗胆碱药物对于痛经的治疗非常重要。盐酸戊乙奎醚是由我国自主开发的一类抗胆碱新药，前期的工作表明其对胆碱受体的选择性更高。盐酸戊乙奎醚具有多方面药理作用，如戒毒、肝损伤保护作用、肾损伤保护作用、前脑缺血再灌注损伤的保护作用，同时其临床应用也较多，如：用于胃肠道疾病、眼科疾病、呼吸道疾病、中枢神经系统疾病、麻醉、肾绞痛及膀胱刺激症、抗感染性休克、抗胆绞痛等。

根据实验研究，盐酸戊乙奎醚对治疗原发性的痛经可能具有一定的疗效，但是尚未完全清楚其对痛经治疗的机制，需要采用一种新的评价方法，来验证盐酸戊乙奎醚对治疗痛经的机制。

为了解决现有技术中的上述不足，本发明提出了一种新的解决方案。

发明内容

本发明的目的是提供一种盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞M受体影响的评价方法。

为达上述目的，本发明所采用的技术方案是：提供一种盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞M受体影响的评价方法，包括：

取成年大鼠，随机分组；其中一组腹腔注射雌二醇1mg/kg，每日一次，连续注射三天，然后取其子宫，在恒温水浴中加0.001单位的入催产素，作用10min～20min，获得动物模型子宫；另一组为空白对照组；

取动物模型子宫，随机分成三组，其中一组为模型组，其中一组为阳性对照组加入对照试剂至终浓度0.8mg/ml作用5min～15min，其中一组为实验组加入不同剂量的盐酸戊乙奎醚作用与阳性对照组相同的时间；

将空白对照组、模型组、阳性对照组和实验组的子宫分别粉碎匀浆，将组织液在低温、2000r/min的条件下离心5min～15min；取其上清液，在低温、27000r/min的条件下离心15min～25min，获得细胞膜蛋白沉淀，然后加入缓冲液处理蛋白沉淀，取出部分蛋白沉淀，测定蛋白含量和M受体密度；

分别对比加入不同剂量的盐酸戊乙奎醚实验组与模型组和阳性对照组的细胞M受体密度的差异；

当实验组细胞M受体密度高于模型组细胞M受体密度时，记为该浓度的实验组降低细胞内M受体密度的效力为无效；

当实验组细胞M受体密度低于模型组细胞M受体密度，且高于阳性对照组细胞M受体密度时，记为该浓度的实验组降低细胞内M受体密度的效力为一级；

当实验组细胞M受体密度同时低于模型组和阳性对照组细胞M受体密度时，记为该浓度的实验组降低细胞内M受体密度的效力为二级。

综上所述，本发明具有以下优点：

本发明的一个实施例，可以揭示盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞内M受体密度的影响，并通过与阳性对照组和模型组细胞内M受体密度的对比，可以评价不同浓度下的盐酸戊乙奎醚的效力。

具体实施方式

本发明的一个实施例中，公开了一种盐酸戊乙奎醚对痛经动物模型细胞M受体影响的评价方法，包括获得动物模型子宫、将动物模型子宫分成三组分别处理、对比对比加入不同剂量的盐酸戊乙奎醚实验组与模型组和阳性对照组的细胞M受体密度的差异。

实施例1

取成年大鼠，随机分组；其中一组腹腔注射雌二醇1mg/kg，每日一次，连续注射三天，然后取其子宫，在恒温水浴中加入0.001单位的催产素，作用10min，获得动物模型子宫；另一组为空白对照组。