[发明专利]那西肽过柱纯化工艺有效
申请号: | 201410396686.0 | 申请日: | 2014-08-13 |
公开(公告)号: | CN104231044B | 公开(公告)日: | 2017-03-22 |
发明(设计)人: | 徐天华;黄振;吴中华;陈军;王丽;陈贵才;张小朋;余有龙;严发杰 | 申请(专利权)人: | 甘肃汇能生物工程有限公司 |
主分类号: | C07K5/078 | 分类号: | C07K5/078;C07K1/16 |
代理公司: | 杭州赛科专利代理事务所(普通合伙)33230 | 代理人: | 曹绍文 |
地址: | 733000*** | 国省代码: | 甘肃;62 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 纯化 工艺 | ||
1.那西肽过柱纯化的工艺,其特征在于,其具体步骤如下:
(1)将质量分数70%的那西肽粗品1g加入15-20倍质量的混合溶剂中,加酸调节pH值使那西肽完全溶解;所述混合溶剂为丙酮与体积分数80%的甲醇按体积比1:1-1:2组成;
(2)将两种不同极性类型的大孔吸附树脂A和B分别依次用丙酮和甲醇预处理后,按照质量比1:2~3:4的比例混合后湿法装入柱径比为15:1的层析柱中;所述大孔树脂A型号为HPD-100或与其极性相当的大孔吸附树脂,大孔树脂B 的型号为HPD-500或与其极性相当的大孔吸附树脂;
(3)将步骤(1)的那西肽溶液过步骤(2)的混合树脂柱,控制流速为1-5ml/min,收集过柱液;
(4)将步骤(3)的过柱液用碱中和到中性,减压浓缩到原体积的十分之一,大量固体析出,过滤,水洗滤饼,减压烘干得到纯化后的那西肽,所述那西肽的含量为95%以上。
2.根据权利要求1所述的那西肽过柱纯化工艺,其特征在于,步骤(1)中所述的加酸条件所使用的酸为摩尔浓度0.01-0.1mol/L的盐酸,pH调整到2-4。
3.根据权利要求1所述的那西肽过柱纯化工艺,其特征在于,步骤(2)中所述的大孔树脂A和B按照质量比3:5的比例进行混合填充。
4.根据权利要求1所述的那西肽过柱纯化工艺,其特征在于,步骤(3)中所述的过柱速度为2-3ml/min。
5.根据权利要求1所述的那西肽纯化工艺,其特征在于,步骤(4)中所述的中和用碱为摩尔浓度0.01-0.1mol/L的NaOH。
6.根据权利要求1所述的那西肽纯化工艺,其特征在于,步骤(4)中所述的减压浓缩温度不超过50℃,真空干燥温度不超过50℃。
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