[发明专利]一种惠州中慢生根瘤菌及其用途

说明书

技术领域：

本发明属于微生物领域，具体涉及一种惠州中慢生根瘤菌及其用途。

背景技术：

植物在受到干旱、洪涝、高低温、盐碱及重金属等逆境胁迫和病原微生物侵染时会应激产生大量植物激素乙烯，高浓度的乙烯会抑制植物的生长和发育。1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(1-aminocyclopropane-1-carboxylate deaminase，简称ACC脱氨酶)是一种能够抑制植物体内乙烯合成的胞内聚合酶，该酶能将乙烯合成前体ACC分解为α-酮丁酸和氨。ACC脱氨酶是细菌促进植物生长的一种重要特性，能够增强植物的抗盐胁迫、抗干旱胁迫、抗重金属污染、抗有害微生物侵染等能力。ACC脱氨酶基因的表达能够提高根瘤菌的结瘤能力和豆科宿主的耐受性。筛选具有ACC脱氨酶活性的菌株对根瘤菌菌剂的田间应用具有重要的应用意义。

在欧美国家的林业生产中，一定程度上依赖植物促生菌的贡献，重视植物促生微生物资源的开发与利用。由于物价的上涨、保护环境意识的提高，生物制剂以其物美价廉、环保等优势而独受青睐。世界上许多国家都把研究和开发微生物肥料及制品作为一项长远的计划。

相思(Acacia)是我国南方引种的重要树种，其适应性广、耐干旱痔薄，还能与细菌共生形成根瘤，产生固氮作用，具有良好的改良土壤性能，目前已进入了规模化种植阶段，已在林业产业和生态环境建设中发挥了重大作用。针对研究的进展和林业生产应用需要，选择合适的根瘤菌微生物肥料，减少化学肥料的施放，可实现经济效益及生态效能的双赢，并能带动林业技术进步。

菌种是微生物肥料生产与应用的核心。目前限制我国微生物肥料行业发展的瓶颈是优良菌株的筛选问题。林业生产迫切需求固氮能力强、抗逆性强的微生物肥料生产用菌株。

发明内容：

本发明的目的是提供一种ACC脱氨酶活性高，能与黑木相思、网脉相思和灰木相思共生结瘤的新菌种－惠州中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huizhouense)RITF711，该菌于2014年7月23日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M2014354。

本发明还提供了惠州中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huizhouense)RITF711在制备固氮微生物菌剂或生物有机肥中的应用。

本发明是从黑木相思根瘤中分离筛选出的惠州中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huizhouense)RITF711，其具有较强的ACC脱氨酶活性，该类菌株还能与黑木相思(Acacia melanoxylon)、网脉相思(Acacia aneura)和灰木相思(Acacia implexa)等结瘤共生，具有强的抗逆性，在固氮微生物菌剂和生物有机肥生产中具有广阔的应用前景。

本发明的惠州中慢生根瘤菌(Mesorhizobium huizhouense)RITF711于2014年7月23日保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国武汉武汉大学，保藏编号为CCTCCNO：M2014354。

附图说明：

图1是惠州中慢生根瘤菌RITF711的16S rRNA与参比菌株的系统发育树

图2是惠州中慢生根瘤菌RITF711的透射电镜照片。

具体实施方式：

以下实施例是对本发明的进一步说明，而不是对本发明的限制。

下述实施例中所使用的实验方法如无特殊说明，均为常规方法。

下述实施例中所用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到。

YMA培养基：甘露醇10.0g，谷氨酸钠0.5g，K₂HPO₄0.5g，MgSO₄·7H₂O 0.2g，NaCl0.01g，酵母粉0.5g，琼脂粉17g，蒸馏水1000mL，pH 7.0。灭菌备用。