[发明专利]一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用

说明书

技术领域

本发明涉及微生物领域，具体涉及一种内生细菌深褐芽孢杆菌菌株、微生物菌剂及其制备方法和应用。

背景技术

随着社会发展，人们对食品的要求越来越高，基于化学农药对环境的污染和农药残留等问题，植物病害的生物防治成为了研究热点，其中尤以植物内生细菌作为拮抗菌的研究得到众多学者的观注。植物内生细菌是指生活在植物体内，但对植物没有任何实质性伤害的细菌，其具有固氮、溶磷和产IAA等生物学功能，特别是抑菌功能是其成为生防菌资源的有力支撑。植物内生菌的固氮、溶磷和产IAA等生物学功能对宿主有促进生长的作用；植物内生细菌也可以通过分泌抑菌物质、与病原菌竞争营养空间及诱导植物获得抗病性阻止或降低病原菌对植物的侵染或造成的危害。以内生细菌为菌种资源研制的微生物农药不易产生抗药性，不伤害天敌，且能利用农副产品等广泛生产，更重要的是内生细菌可以定殖于作物体内，甚至可以通过种子(苗木)传播于下一代，长期起作用，省时省力，高效，应用于农业生产后为生产绿色或无公害农产品提供了一个新的途径。

微生物肥料作为一种新型肥料，施入土壤后，通过其特定菌株的快速繁殖，能固定大气中的氮素、释放土壤中固定态的磷、钾元素，使得环境的养分潜力得以充分发挥，并为作物生长营造一个良好的土壤微生物环境，在减少化肥用量、降低环境污染、提高农作物品质等方面具有重要意义。尤其是集抑菌、固氮、解磷、解钾和作物生长素于一身的复合微生物肥料的研发，在农业可持续发展中有举足轻重的作用。

发明内容

本发明的目的就是针对上述现有技术中化学农药和化学肥料环保性差、易产生抗药性和安全性差的缺陷，提供了一种内生细菌深褐芽孢杆菌菌株。

为了实现上述目的，本发明提供的技术方案为：一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株，命名为深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)菌株QLY001，保藏单位为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏时间为2014年03月10日，保藏编号为CGMCC No.8904。

进一步的，上述的一种高寒草地牧草内生细菌深褐芽孢杆菌菌株，所述深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)菌株QLY001在不含色氨酸的King氏培养基中分泌IAA的浓度为2.6mg/L，在含100mg/L色氨酸的King氏培养基中分泌IAA的浓度为3.42mg/L。

本发明的第二个目的是提供了上述一种内生细菌深褐芽孢杆菌菌株在抑制病原菌中的应用。

进一步的，上述的应用，所述病原菌包括有马铃薯褐腐病菌(Stysanus stemonitis)、马铃薯坏疽病菌(Phoma foveata)、小麦根腐病菌(Bipolaris sorokiniana)、番茄早疫病原菌(Alternaria solani)、马铃薯炭疽病菌(Colletotrichum coccodes)、马铃薯枯萎病菌(Fusarium avenaceum)、孜然根腐病菌(Fusarium solani)和马铃薯干腐病菌(Fusarium oxysporum)。

本发明的第三个目的是提供了一种微生物菌剂，其活性成分为上述深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)菌株QLY001的菌体。

进一步的，上述的一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中，含有按重量百分比计的深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)菌株QLY0016-12％，培养基余量。

进一步的，上述的一种微生物菌剂，所述培养基由以下物质组成：氯化铵8-16g，玉米粉13-21g，牛肉膏4-6g，蒸馏水或无离子水1000mL，所述培养基的pH值为6.6-7.4。

进一步的，上述的一种微生物菌剂，所述微生物菌剂中，深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)菌株QLY001的活菌数为1.82×10¹⁰CFU/mL-3.5×10¹⁰CFU/mL。

本发明的第四个目的是提供了上述一种微生物菌剂的制备方法，是将深褐芽孢杆菌(Bacillus atrophaeus)菌株QLY001接入至培养基中发酵，接入量为6-12％，发酵时间为33-39h，发酵温度为24-32℃，发酵转速为140-180r/min，发酵溶氧量为55％-75％。

本发明的第五个目的是提供了上述一种微生物菌剂在制备农药或肥料中的应用。