[发明专利]一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法

权利要求书

1.一种从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于其包括如下步骤：

肝素钠粗品加水溶解成质量体积浓度为8%~15%的溶液，离心分离沉淀和上清液；

取步骤1)所得上清液加入氯化钙，使溶液中氯化钙的质量体积含量达15%~25%，用盐酸调节溶液的pH值至5.0~5.5后，进行沉淀并分离出沉淀物；

将步骤2)所得沉淀物加水溶解成为质量体积浓度8%~15%的溶液，加入醋酸钙，用醋酸调节溶液的pH值至5.0~5.5后，进行沉淀并分离出沉淀物；

将步骤3)所得的沉淀物加水溶解成质量体积浓度为10%~15%的肝素钠溶液，然后进行降解、还原以及采用乙醇沉淀后得到含有游离硫酸根的低分子肝素，加水将其溶解成质量体积浓度为8%~15%的低分子肝素溶液；

步骤4)所得的低分子肝素溶液加入质量浓度3.0~12.0%的氯化钡溶液，充分搅拌后除去沉淀物；

步骤5)所得溶液中加入阴离子交换树脂，再加入0.5~0.8倍树脂体积的氯化钙溶液，充分搅拌吸附后沥干吸附液；

配制0.3~0.8倍树脂体积的氯化钙溶液，加入步骤6）所得树脂中搅拌洗脱3~6小时，洗脱1次或多次，收集洗脱液；

步骤7)所得的洗脱液中，用氢氧化钙饱和溶液调节溶液pH值至10.5～11.0，加入过氧化氢，进行搅拌氧化反应，氧化结束后用酸溶液调节pH值至6.0~6.5；

步骤8)所得的氧化后的溶液用滤膜过滤除菌，再加入滤液体积1.0~1.5倍的乙醇沉淀，搅拌均匀，静置沉淀10~20小时，沉淀物脱水烘干后即为那曲肝素钙原料。

2.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤1)所述的肝素钠粗品是从新鲜的健康生猪的小肠粘膜中提取制成，所述的肝素钠粗品中含有病毒、内毒素、蛋白质、核酸、类肝素和不溶性杂质之类的杂质。

3.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤3）中，醋酸钙的投加量使其在溶液中的质量体积浓度达到35~45%。

4.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤2）或步骤3）中，进行沉淀的时间为16~36小时。

5.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤4)中，使用亚硝酸钠进行降解，使用硼氢化钠进行还原，然后再使用乙醇进行沉淀，到含有游离硫酸根的低分子肝素；该步骤中进一步的将肝素钠溶液调节pH值至2.5~3.0后使用亚硝酸钠进行降解，然后在pH值8.5~9.5条件下使用硼氢化钠进行还原，最后调节pH值至7.0~7.5时用乙醇沉淀。

6.根据权利要求5所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于所述亚硝酸钠的量为肝素钠重量的1.0%~10.0%，优选为2.0%~5.0%，最优选为2.5%~3.5%；硼氢化钠的量为亚硝酸钠重量的20%~50%，优选为25%~35%，最优选为35%；沉淀所需乙醇的加入量为肝素钠溶液体积的1.0~1.5倍。

7.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤5)所述的氯化钡溶液为低分子肝素溶液体积的1.0~1.5倍。

8.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤6)所述的阴离子交换树脂的重量为肝素钠重量的2~4倍；搅拌吸附的时间为5~12小时。

9.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤6)所述的氯化钙溶液浓度为0.1mol/L~1.0 mol/L，优选为0.1 mol/L ~0.5mo/L，最优选为0.1mol/L；步骤7)所述的氯化钙溶液浓度为1.0 mol/L~2.0mol/L，优选为1.2 mol/L ~1.8mol/L ，最优选为1.5mol/L。

10.根据权利要求1所述的从肝素钠粗品生产那曲肝素钙的方法，其特征在于步骤8）中进行搅拌氧化反应的时间为3~4小时；所述过氧化氢的加入量为洗脱液总体积的0.3%~1.5%，优选为0.8%~1.2，最优选为0.9%~1.1%。