[发明专利]一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的缓冲液

说明书

技术领域

本发明涉及医学检验领域，特别是涉及一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的缓冲液。

背景技术

谷氨酰基转移酶（GGT，又称γ-谷氨酰转肽酶或γ-GGT）存在于人体不同组织中，血清中的GGT主要来自肝胆系统，在肝脏疾病或肝脏受损时，均可引起GGT升高，因此GGT在临床上常用于阻塞性黄疸、胆管炎和胆囊炎等疾病的诊断中。现有技术中，血清GGT总活性测定是临床常规开展的酶学检测项目之一。

目前测定GGT一般采用连续监测法，GGT作用于无色的L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺，产生黄色的对硝基苯胺，在波长405 nm进行连续监测，也可用固定时间比色法。具体反应原理如下：

。

样本中的GGT催化底物中的谷氨酰基转移至双甘肽，生成γ-谷氨酰双甘肽和5-氨基-2-硝基苯甲酸盐，后者的生成引起在波长405 nm处吸光度的上升，上升速率与GGT活力成正比。然而要保证上述反应的正常进行，必需有一个稳定的缓冲溶液环境。缓冲液是决定谷氨酰基转移酶发生酶促反应的制约因素，是该酶测定试剂盒的重要组成部分。专利US3769173中测定血清GGT的优选缓冲液为pH 8.2的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲液（Tris-HCl缓冲液）；专利US5474906 A测定GGT采用了GOOD’S系列缓冲液，使用浓度从20 mM ~100 mM不等。此外满足以上反应所需碱性条件的常用缓冲液还有2-氨基-2-甲基-1-丙醇（AMP）-盐酸缓冲液、硼砂-硼酸缓冲液、磷酸盐缓冲液等。

发明内容

本发明主要解决的技术问题是提供一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的缓冲液，使与之配伍的试剂盒在测定数据的准确度和稳定性方面均优于现有报道的缓冲液。

为解决上述技术问题，本发明采用的一个技术方案是：提供一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的缓冲液，所述缓冲液是以三羟甲基氨基甲烷（Tris）-柠檬酸作为缓冲体系用于人血清谷氨酰基转移酶测定的试剂盒中，所述试剂盒包括第一试剂和第二试剂，所述第一试剂的成分组成为：Tris 10~25 g/L、双甘肽 15 g/L、海藻糖 0.5 g/L、柠檬酸 1.5 g/L，所述第二试剂的成分组成为：Tris 10~25 g/L、L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺（GPNA） 4g/L、柠檬酸 5 g/L、叠氮钠 0.3g/L。

在本发明一个较佳实施例中，所述第一试剂的成分组成为：Tris 24 g/L、双甘肽 15 g/L、海藻糖 0.5 g/L、柠檬酸1.5 g/L。

在本发明一个较佳实施例中，所述第二试剂的成分组成为：Tris 24 g/L、L-γ-谷氨酰-对硝基苯胺（GPNA） 4g/L、柠檬酸5 g/L、叠氮钠 0.3g/L。

本发明的有益效果是：本发明的用于人血清谷氨酰基转移酶测定的缓冲液采用Tris-柠檬酸作为缓冲体系，与该缓冲液配伍的试剂盒不仅性能可达到目前报道的常用缓冲液的水平，而且在测定数据的准确度和稳定性方面均表现更优。Tris-柠檬酸可作为人血清谷氨酰基转移酶测定试剂盒所需缓冲液种类的重要补充，为人血清谷氨酰基转移酶测定试剂盒缓冲体系种类提供了一种新的选择，值得推广使用。

具体实施方式

下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅是本发明的一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本发明保护的范围。

本发明下面实施例涉及的仪器有：UV Blue Star紫外分光光度计1台（北京莱伯泰科仪器有限公司，亦或者其它品牌）、恒温数显水浴锅1台（上海梅香仪器有限公司，亦或者其它品牌）。

实施例一：

提供一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的试剂盒，所述试剂盒由试剂1和试剂2组成，以Tris-柠檬酸作为缓冲体系：

试剂1：

试剂2：

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实施例二：

提供一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的试剂盒，所述试剂盒由试剂1和试剂2组成，以Tris-硼酸作为缓冲体系：

试剂1：

试剂2：

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实施例三：

提供一种用于人血清谷氨酰基转移酶测定的试剂盒，所述试剂盒由试剂1和试剂2组成，以磷酸盐作为缓冲体系：

试剂1：