[发明专利]一种同时提高桑黄液体发酵多糖和漆酶产量及活性的方法

权利要求书

1.一种同时提高桑黄液体发酵多糖和漆酶产量及活性的方法，其特征在于，包括步骤：

(1)桑黄的液体发酵培养：将活化后的桑黄菌种接种于添加有桑枝提取物的液体种子培养基进行桑黄液体发酵培养；

(2)外源刺激物对桑黄细胞的诱导培养：在桑黄液体发酵培养第1天-5天，加入占液体种子培养基体积0.02％-0.6％的马银花叶酶解物和占液体种子培养基体积0.02％-0.1％的谷氨酰胺进行第Ⅰ阶段发酵培养，继续培养2天-6天后，加入占液体种子培养基体积0.01％-0.5％的龙脑樟降解物和占液体种子培养基体积0.01％-0.08％的α-蒎烯进行第Ⅱ阶段发酵培养，然后继续培养1天-5天，得到桑黄液体发酵液。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中，所述的桑枝提取物的添加量为液体种子培养基体积的5％-10％。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于，所述的桑枝提取物的制备方法，包括：称取一定量的桑枝条，粉碎，先加占桑枝条重量8倍量-10倍量质量百分浓度为70％-80％的乙醇水溶液在80℃-85℃浸提1.5h-2h，过滤后得到上清液，上清液浓缩真空冷冻干燥后得提取物Ⅰ；上述醇提后的桑枝残渣加占桑枝条重量8倍量-10倍量水在95℃-100℃下浸提2h-2.5h，过滤后得到上清液，上清液浓缩真空冷冻干燥后得提取物Ⅱ；合并所述提取物Ⅰ和提取物Ⅱ得桑枝提取物。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的桑黄液体发酵培养的温度为20℃-30℃。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的马银花叶酶解物的制备方法，包括：将马银花叶加水磨成浆液，灭酶；调节浆液pH4.0-5.5，加入由纤维素酶和半纤维素酶构成的第一复合酶，在40℃-50℃进行酶解反应0.5小时-1.5小时，灭酶后调节浆液pH5.0-7.0，加入由木瓜蛋白酶和中性蛋白酶构成的第二复合酶，于50℃-60℃进行酶解反应1小时-1.5小时，灭酶后离心，上清液经过滤、浓缩和干燥，得到马银花叶酶解物。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的第一复合酶与马银花叶的质量比为1：30-50；所述的第二复合酶与马银花叶的质量比为1：25-60。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的纤维素酶与半纤维素酶的质量比为1:2至4:1。

8.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述的木瓜蛋白酶与中性蛋白酶的质量比为1:3至2:1。

9.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中，所述的龙脑樟降解物的制备方法，包括：将虎奶菌接种在添加有龙脑樟的培养基中培养3天-15天，将培养物过滤，滤液经灭菌、浓缩和干燥得到龙脑樟降解物。

10.根据权利要求9所述的方法，其特征在于，所述的添加有龙脑樟的培养基组成为：龙脑樟15g/L-35g/L、葡萄糖15g/L、酵母粉3g/L、蛋白胨4g/L、KH₂PO₄1.5g/L、MgSO₄0.75g/L和余量的水。