[发明专利]一种微生物秸秆腐熟剂及其制备方法

权利要求书

1.一种微生物秸秆腐熟剂，其特征在于：以纤维酶制剂、白腐菌、枯草芽孢杆菌、嗜热裂孢菌、短小芽孢杆菌、酿酒酵母作为生产菌种；

其中所述白腐菌≥0.4亿CFU/g，枯草芽孢杆菌≥0.2亿CFU/g，嗜热裂孢菌≥0.2亿CFU/g，所述酿酒酵母≥0.2亿CFU/g。

2.如权利要求1所述的微生物秸秆腐熟剂，其特征在于：所述秸秆腐熟剂为粉状剂型。

3.如权利要求1所述的微生物秸秆腐熟剂，其特征在于：所述纤维酶制剂为木霉和曲霉中两种或多种混合固体发酵，发酵物干燥粉碎后制得。

4.如权利要求3所述的微生物秸秆腐熟剂，其特征在于：所述木霉包括绿色木霉、里氏木霉、康宁木霉、棘孢木霉、深绿木霉、哈茨木霉、长枝木霉。

5.如权利要求3所述的微生物秸秆腐熟剂，其特征在于：所述曲霉包括黑曲霉、米曲霉、烟曲霉、土曲霉、解乌头酸曲霉、黄曲霉。

6.如权利要求1-5任一所述的微生物秸秆腐熟剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）制备纤维酶制剂

将木霉和曲霉中两种或多种混合固体发酵，发酵物干燥粉碎后制备纤维酶制剂；

固体发酵培养基包含麸皮50-80wt%、稻草粉25-40wt%、硫酸铵1-5wt%、磷酸二氢钾1-5wt%、碳酸钙1-5wt%、硫酸镁0.1-1wt%、氯化钙0.1-1wt%、氯化钠0.1-1wt%；

（2）制备白腐菌

将白腐菌经两次发酵，第一次发酵条件为30-35℃，培养2-3天，每天搅拌2-3次；第二次发酵条件为30-35℃，培养8-10天，每天搅拌5-10次；第一次发酵物按照重量比1:5-10加入到第二次发酵培养基中，培养结束后添加吸附剂，吸附剂的重量为培养底物的10-15倍，干燥粉碎后制备白腐菌粉末；

其中，白腐菌发酵用液体培养基为葡萄糖20g/L、蔗糖15 g/L、酵母粉2 g/L、磷酸二氢钾1.5 g/L、七水硫酸镁0.5 g/L和维生素B1 4mg/L；

固体培养基为麦麸10-30wt%、稻草粉10-30wt%、花生壳35-55wt%、豆饼粉1-5wt%、尿素0.1-2wt%、磷酸氢二钾0.1-0.5wt%、硫酸镁0.1-0.5wt%和少量水；

吸附剂选自草炭、沸石粉、膨润土和轻质碳酸钙中的一种或多种；

（3）制备枯草芽孢杆菌       

将枯草芽孢杆菌的原始菌经摇床培养、种子培养、发酵罐培养后，将发酵液离心处理，然后加入吸附剂，干燥粉碎制备枯草芽孢杆菌粉末；

其中枯草芽孢杆菌摇床培养基为肉汤，种子培养基包含玉米粉1-10wt%、蛋白胨0.5-3wt%、豆饼粉0.5-3wt%、尿素0.1-1wt%，发酵罐培养基包含玉米粉2-8%、蛋白胨0.5-3%、豆饼粉0.5-5%、尿素0.1-1%、磷酸氢二钾0.1-1%；

吸附剂选自草炭、沸石粉、膨润土和轻质碳酸钙中的一种或多种；

（4）制备嗜热裂孢菌

将嗜热裂孢菌的原始菌经摇床培养、种子培养、发酵罐培养后，将发酵液离心处理，然后加入吸附剂，干燥粉碎制备嗜热裂孢菌粉末；

其中，种子培养基和发酵培养基为蛋白胨10g、酵母膏5g、牛肉膏5g、CMC-Na 10g，蒸馏水1000mL，pH7.2，121℃；

吸附剂选自草炭、沸石粉、膨润土和轻质碳酸钙中的一种或多种；

（5）制备短小芽孢杆菌

液体种子培养基和发酵培养基为：牛肉膏3g、蛋白胨10g、氯化钠10g、蒸馏水1000mL；将短小芽孢杆菌接种到液体种子培养基进行培养，2天后，接种到发酵罐进行液体发酵生产，发酵液浓度变稠后，按照40%v/w加入麦麸，真空干燥，粉碎成菌种粉，固体吸附菌剂，低温保存备用；

（6）制备酿酒酵母菌

将酿酒酵母菌接种到豆芽汁种子培养基，培养温度30℃，培养2天后按8%比例接种到发酵罐进行液体发酵生产，培养结束后添加吸附剂，吸附剂的重量为培养底物的10-15倍，干燥粉碎后制备；

吸附剂选自草炭、沸石粉、膨润土、轻质碳酸钙中的一种或多种；

（7）制备秸秆腐熟剂

将制备的上述固体菌剂按一定的重量比进行混合，从而制得秸秆腐熟剂。