[发明专利]一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种灵芝菌丝体多糖锗的提取方法。

背景技术

灵芝是一种药用价值很高的大型真菌，具有免疫调节、抗肿瘤、抗癌等功效，并且对心脑血管疾病具有较高的药理活性。近年来国内外学者已从灵芝中分离出150余种化合物，可分为十大类：多糖类、有机锗、生物碱类、氨基酸蛋白质类、三萜类、油脂类、无机离子等。灵芝的药理活性与灵芝中含有的高分子免疫多糖、有机锗等有效化学成分密切相关。因此，研究灵芝有效化学成分具有重要意义。

灵芝多糖是灵芝主要活性成分之一，是抗衰老、扶正固本的主要有效成分之一，它能增强细胞的免疫调节作用，调节核酸和蛋白质的代谢平衡，清除氧自由基，提高体外传代细胞分裂代数的能力。灵芝多糖能提高白细胞介素II产生，增强毒T细胞的功能，对小白鼠细胞内的SOD的活性有明显的增强作用，可增强老年小鼠脾细胞内DNA多聚酶的活性，具有一定的抗衰老能力。灵芝多糖的免疫调节作用是广泛的，不仅包括提高抗原提呈细胞、单核细胞吞噬系统的活性，而且包括增强细胞免疫和体液免疫功能，作用位点涉及从免疫前体细胞增生、分化到效应细胞的各个过程。灵芝多糖还具有抗肿瘤、增强机体耐缺氧能力、抗疲劳、抗辐射、增加记忆力等作用，其具有的保健和药用价值已得到研究人员和学术界普遍认可。

近二十年来，有机锗化合物的合成及生物活性研究工作主要集中在倍半锗、介吗川类有机锗、螺锗和卟啉锗这四类化合物上。其中B一羧乙基锗倍半氧化物(即Ge一132)已经进入临床研究阶段。Ge一132((GeCH∶CH∶COOH)。03)是由3-5个分子组成的低聚合物。它是一种干扰素诱发剂，可把“沉睡的”巨噬细胞诱变为抗肿瘤的巨噬细胞，从而诱发抗癌性干扰素的活性，而且几乎没有毒性。螺锗及其衍生物中以螺锗的活性最高，能抑制蛋白质的合成，对各种早期癌症的治疗得到了较好的效果。但由于螺锗毒副作用很大，故在临床应用上受到很大限制。倍半锗和介吗川类有机锗化合物的合成及生理活性研究一直是近二十年来的热门课题。(2)天然有机锗：由天然植物、真菌中提取或直接食用，对人体无任何毒副作用。许多名贵的中草药人参、枸杞子、猢狲眼等及灵芝、山豆根、土豆等有色蔬菜等食用植物中都含有大量的天然有机锗。(3)生物有机锗：是将锗化合物植入生物体内，如酵母、细菌、大型真菌、蔬菜等，使其与细胞某部位结合，转化为大分子化合物，制成富锗酵母、富锗灵芝等。

有机锗被誉为“人类疾病的克星”、“21世纪救命锗”，其参与体内代谢，具有很强的氧化脱氢能力；有生血刺激作用，表现在增加红细胞和血红蛋白数量，刺激血小板生成，消除血管壁上的脂类附着物，所以对贫血和高胆固醇血脂及糖尿病有一定的疗效；对某些癌肿、免疫功能低下、骨质疏松、早衰、高血压症等，有一定的保健效用。

国外对有机锗研究的较早，研究最多的有日本、美国、前苏联等国家。当前，日本、欧美各国学者对有机锗化合物的研究和应用相当活跃，不少学者利用构效关系，设计了不同类型有机锗化合物，进一步加强有机锗化合物具有免疫，抗癌，抗衰老等功能的研究，从分子水平、电子水平探索其药理机理。可以预期，随着有机锗药理作用及其机理的进一步了解，它在防治人类及动物的疾病领域必将出现重大突破。

我国有机锗的研究起步较晚，但近几十年来，我国科研工作者在有机锗，特别是在Ge-132衍生物及其类似物的合成与生物活性研究上，做了大量的工作，发表了许多研究论文，在某些研究领域已经走在世界的前列，尤其是关于抗肿瘤作用方面的研究。

国内近年来开始研究灵芝菌丝体多糖锗提取，但是研究比较少，在这些方法中，专利公开号为CN1687438的专利公开了一种灵芝菌丝体多糖锗的方法，但是该方法经过培养基发酵、灭菌、然后沉淀、直接喷雾干燥，这个方法得到产品纯度非常低，是种混合物。陈孝等人在2004灵芝专题研讨会上提出了通过karstl苗丝体经热水提取、H₂O₂氧化脱色素、Sevage法除蛋白、再通过DEAF：Sephadex A一25分离、Sephadex G一200进一步纯化，得到多糖一种办法。该方法要用到H2O2氧化脱色素，安全性不高，不容易实现工业化。另外由西藏金稞集团在申请专利号201210557516.9的专利中提出了另外一种方法经过菌丝体预处理、超声波提取、乙醇沉淀、去蛋白、精制这个几道工序提取到灵芝菌丝体多糖锗，该工艺在去蛋白的过程中要用到大量的氯仿，对人体伤害很大，而且该工艺在最后精致过程中要用乙醇沉淀4次，导致该工艺非常复杂烦琐，不合适大工艺生产。所以，发明一种能连续大生产工艺就非常必要。

发明内容