[发明专利]一种标准机CCD设置方法-酶标孔法无效
申请号: | 201410413235.3 | 申请日: | 2014-08-20 |
公开(公告)号: | CN104198742A | 公开(公告)日: | 2014-12-10 |
发明(设计)人: | 穆海东;汪宁梅;王磊 | 申请(专利权)人: | 曲阜裕隆生物科技有限公司 |
主分类号: | G01N35/00 | 分类号: | G01N35/00;G01N33/535 |
代理公司: | 济南舜源专利事务所有限公司 37205 | 代理人: | 于晓晓 |
地址: | 273100 山东省*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 标准 ccd 设置 方法 酶标孔法 | ||
技术领域
本发明涉及技术领域,特别是涉及一种标准机CCD设置方法-酶标孔法。
背景技术
现有技术中采用常规方法,使用CCD检测仪进行免疫方面的检测,所需时间长,大约需要16个小时,给操作人员带来了比较繁重的工作压力,不符合高效的工作模式,因此需要对现有的检测方法进行改进。
发明内容
本发明的目的就是针对上述存在的缺陷而提供一种标准机CCD设置方法-酶标孔法。酶标法计算出的CCD参数比现有技术方法略好,所需时间短,原先需要16个小时现在缩短到3个小时完成。
本发明的一种标准机CCD设置方法-酶标孔法技术方案为,包括以下步骤:
(1) 准备工作:准备好酶标孔和酶标孔架,移液器一把,加样头若干,发光液,HRP-IgG;
(2) 加样:取对称的酶标孔8个;加入HRP-IgG、发光液,等待1-5min后开始拍摄;
(3) 检测仪准备:设置好测试模板,并设置好曝光时间;
(4) 开始每组测试:对称的八个孔为一组同时测试,拍摄完后对换中间四个孔与其他四孔,再拍摄一次;
(5) 数据导出:拍摄完一组后,从数据管理里面导出数据,并做好标识(检测仪序列号、相关位置、第几组);直到完成每个位置的三组拍摄;
(6) 数据导入:从数据管理界面导入相应检测仪的相关数据;
(7) 数据读取:打开导入的数据,选择对应拍摄的位置,读取计算结果,并导出到EXCEL文件;
(8) 数据处理:以中间4个孔为基准点,同一样品第一和第二次拍摄的信号值相除计算出比例,两者平均计算出CCD值;
(9)数据验证与比较:修改CCD参数后,在同位置八个点再次加入酶和发光液计算CV,与原始方法算出的CCD参数比较;所有点都计算出后,整版加入酶和发光液验证。
步骤(2)中,取对称的酶标孔8个,分布在酶标架的D3/E3/D4/E4,和其他四点。
步骤(2)中,HRP-IgG加入10ul,加入发光液50ul。
步骤(2)中,等待2min后开始拍摄。
步骤(3)中,曝光时间5-20s。
步骤(3)中,曝光时间10s。
步骤(8)中,数据处理过程CCD值均设为1000。
步骤(9)中,要求CV<3。
本发明的有益效果为:采用本发明的一种标准机CCD设置方法-酶标孔法,检测时间大幅度缩短。原先需要16个小时现在缩短到3个小时完成。
附图说明:
图1所示为本发明酶标法计算出的CCD参数与现有技术比较图。
具体实施方式:
为了更好地理解本发明,下面用具体实例来详细说明本发明的技术方案,但是本发明并不局限于此。
实施例1
本发明的一种标准机CCD设置方法-酶标孔法,包括以下步骤:
(1) 准备工作:准备好酶标孔和酶标孔架,移液器一把,加样头若干,发光液,HRP-IgG;
(2) 加样:取酶标孔8个,分布在酶标架的D3/E3/D4/E4,和其他四点;HRP-IgG加入10ul,加入发光液50ul,等待2min后开始拍摄;
(3) 检测仪准备:设置好测试模板,并设置好曝光时间10s;
(4) 开始每组测试:对称的八个孔为一组同时测试,拍摄完后对换中间四个孔与其他四孔,再拍摄一次;
(5) 数据导出:拍摄完一组后,从数据管理里面导出数据,并做好标识(检测仪序列号、相关位置、第几组);直到完成每个位置的三组拍摄;
(6) 数据导入:从数据管理界面导入相应检测仪的相关数据;
(7) 数据读取:打开导入的数据,选择对应拍摄的位置,读取计算结果,并导出到EXCEL文件;
(8) 数据处理:以D3/E3/D4/E4为基准点(CCD值均设为1000),同一样品第一和第二次拍摄的信号值相除计算出比例,两者平均计算出CCD值。
(9)数据验证与比较:修改CCD参数后,在同位置八个点再次加入酶和发光液计算CV,要求CV<3,与原始方法算出的CCD参数比较;所有点都计算出后,整版加入酶和发光液验证。
拍摄记录数据如表1所示:
表1
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计算结果如表2所示:
表2
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