[发明专利]一种利用多免疫途径生产羊抗IgA多抗血清的方法无效
申请号: | 201410413762.4 | 申请日: | 2014-08-20 |
公开(公告)号: | CN104177498A | 公开(公告)日: | 2014-12-03 |
发明(设计)人: | 徐志伟;刘伟忠;刘照亭;鲁群 | 申请(专利权)人: | 镇江万山红遍农业园 |
主分类号: | C07K16/42 | 分类号: | C07K16/42;C07K16/06 |
代理公司: | 北京众合诚成知识产权代理有限公司 11246 | 代理人: | 龚燮英 |
地址: | 212400 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 利用 免疫 途径 生产 iga 多抗 血清 方法 | ||
1.一种利用多免疫途径生产羊抗IgA多抗血清的方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)免疫原乳剂的制备:将含有IgA抗原20mg的血清0.1ml,无菌PBS1.9ml,弗氏佐剂2ml混合并乳化,得到免疫原乳剂;
2)羊免疫第一针,在羊的前后腹股沟,每腹股沟分2个区域注射,总共12个注射点,皮下注射,足底部2个注射点平均注射;
3)与步骤2)间隔二十天注射第二针,前后腹股沟分2个区域注射,总共12个注射点;
4)与步骤3)间隔十天注射第三针,前后腹股沟分2个区域注射,总共12个注射点;
5)与步骤4)间隔十天注射第四针,前后腹股沟分2个区域注射,总共12个注射点;
6)与步骤5)间隔十天注射第五针,前后腹股沟分2个区域注射,总共12个注射点;
7)与步骤6)间隔五天对免疫的羊动脉采血,血液放入水箱中1小时温度40℃,待血清充分析出,经离心沉淀分离出抗血清,放进冰箱保存温度在4℃—8℃之间;
8)对步骤7)所得抗血清进行效价测定。
2.如权利要求1所述的一种利用多免疫途径生产羊抗IgA多抗血清的方法,其特征在于,步骤1)所述抗原量是指每二头羊的免疫抗原量。
3.如权利要求1或2所述的一种利用多免疫途径生产羊抗IgA多抗血清的方法,其特征在于,所述步骤2)中注射的免疫原乳剂乳化时采用的弗氏佐剂是弗氏完全佐剂,所述步骤3)、4)、5)、6)中注射的免疫原乳剂乳化时采用的弗氏佐剂是弗氏不完全佐剂。
4.如权利要求1或2所述的一种利用多免疫途径生产羊抗IgA多抗血清的方法,其特征在于,所述步骤8)的效价测定采用的方法为琼扩方法。
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