[发明专利]一种用于系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒在审
申请号: | 201410417499.6 | 申请日: | 2014-08-21 |
公开(公告)号: | CN105420347A | 公开(公告)日: | 2016-03-23 |
发明(设计)人: | 冯学兵;孙凌云 | 申请(专利权)人: | 南京大学医学院附属鼓楼医院 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
代理公司: | 南京中新达专利代理有限公司 32226 | 代理人: | 孙鸥;朱杰 |
地址: | 210008 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 系统性红斑狼疮 基因 诊断 试剂盒 | ||
1.一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于,包括有用于扩增OASL、IGS15和LY6E这3个基因的引物,还包括看家基因RPLPO的引物,以及扩增试剂。
2.根据权利要求1所述的一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于,各基因引物序列分别为:
OASL-F:5’-CCATCACGGTCACCATTGTG-3’
OASL-R:5’-ACCGCAGGCCTTGATCAG-3’
ISG15-F:5’-GGTGGACAAATGCGACGAA-3’
ISG15-R:5’-CAGCCCGCTCACTTGCT-3’
LY6E-F:5’-ACTGCGTGACTGTGTCTGCTA-3’
LY6E-R:5’-AGGCTGTGGCCAAATGTC-3’
RPLPO-F:5’-GTTTCATTGTGGGAGCAGACA-3’
RPLPO-R:5’-CATGGTGTTCTTGCCCATCA-3’。
3.根据权利要求1所述的一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于所述扩增试剂包括预混有PCR缓冲液和dNTPs的热启动Taq酶、ROX惰性参比染料和超纯水。
4.根据权利要求3所述的一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于,扩增试剂由以下体积的组分组成:cDNA1.0μl,PremixExTaqTM(2×)10μl,ROX惰性参比染料(50×)0.4μl,上游引物0.4μl,下游引物0.4μl,超纯水7.8μl。
5.根据权利要求4所述的一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于,通过实时定量PCR技术检测LY6E、IGS15、OASL的表达,取3次检测值的平均数计算荧光信号到达设定阈值时所经历的循环数,减去看家基因RPLPO到达阈值时的循环数值计算出差异值,再通过2-差异值计算各基因相对表达值。
6.根据权利要求1所述的一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于,通过计算改良干扰素指数进行结果判断,以待测样品基因相对表达值-正常组平均基因相对表达值,再除以正常组基因表达标准差,计算出单个基因干扰素指数,将对应于LY6E、ISG15和OASL的三个值相加,即为改良干扰素指数。
7.根据权利要求6所述的一种系统性红斑狼疮的基因诊断试剂盒,其特征在于,在改良干扰素指数为2.37时,其诊断的敏感性和特异性达到最佳界值,分别为70%和80%。
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