[发明专利]猪伪狂犬病病毒基因缺失株、疫苗组合物及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种猪伪狂犬病毒弱毒株，其中，所述猪伪狂犬病毒弱毒株为gI/gE/11K/28K蛋白失活的猪伪狂犬病毒株，优选地，所述伪狂犬病毒株为伪狂犬变异株。

2.根据权利要求1所述的猪伪狂犬病毒弱毒株，其中，所述猪伪狂犬病毒弱毒株基因组中gI/gE/11K/28K整个ORF缺失。

3.根据权利要求1所述的猪伪狂犬病毒弱毒株，其中，所述伪狂犬变异株为gE蛋白序列为SEQ ID NO.07或与其序列同源性为95％以上的毒株；优选地，所述的猪伪狂犬变异株为经分离的所述猪伪狂犬病毒变异株当重现所述猪伪狂犬病毒变异株感染时，免疫了现有技术中基因缺失伪狂犬弱毒疫苗后依然会造成猪出现高热，精神沉郁，食欲下降或废绝症状的毒株；更优选地，所述的猪伪狂犬变异株为当重现所述猪伪狂犬病毒变异株感染时，免疫了现有技术中缺失gE、TK和gI基因中的一个及一个以上基因的伪狂犬弱毒疫苗后所述猪依然感染猪伪狂犬病，并且所述猪伪狂犬病毒变异株具备具有使9-10日龄仔猪精神沉郁和食欲下降的毒株。

4.根据权利要求1所述的猪伪狂犬病毒弱毒株，其中，所述伪狂犬病毒株为HN1201株、HN1202株、JS-2012株、猪伪狂犬HeN1株、NVDC-PRV-BJ株、NVDCPRV-HEB株或NVDC-PRV-SD株、PRV TJ株或PRV-ZJ01株。

5.根据权利要求1～4任一项所述的猪伪狂犬病毒弱毒株，其中，所述的猪伪狂犬病毒弱毒株进一步TK蛋白失活；优选地，所述猪伪狂犬病毒弱毒株基因组中TK位置的核苷酸序列编码表达SEQ.NO.4的氨基酸序列。

6.一种疫苗组合物，其中，所述疫苗组合物包括免疫量的权利要求1～5任一项所述的猪伪狂犬病毒弱毒株抗原和载体；优选地，猪伪狂犬病毒弱毒株抗原含量为≥10^6.0TCID₅₀头份。

7.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其中，所述猪伪狂犬病毒弱毒株抗原为活的所述猪伪狂犬病毒弱毒株；所述疫苗组合物进一步包括冻干保护剂。

8.根据权利要求6所述的疫苗组合物，其中，所述疫苗进一步含有失活病原体或抗原组分，优选地，所述抗原为猪瘟病毒抗原、猪繁殖与呼吸综合征病毒抗原、猪圆环病毒抗原和/或副猪嗜血杆菌抗原或猪肺炎支原体抗原。

9.一种疫苗组合物的制备方法，其中，所述方法包括：(1)扩增培养权利要求1～5任一项所述猪伪狂犬病毒弱毒株；以及(2)在所述扩增培养的猪伪狂犬病毒弱毒株中加入冻干保护剂。

10.权利要求6～7任一项所述的疫苗组合物在制备预防和治疗猪伪狂犬病的药物中的应用，优选地，所述的猪伪狂犬病是由权利要求3所述的猪伪狂犬病毒株变异株导致的猪伪狂犬病。