[发明专利]汞离子检测试剂盒及汞离子检测方法在审
申请号: | 201410419168.6 | 申请日: | 2014-08-22 |
公开(公告)号: | CN104155252A | 公开(公告)日: | 2014-11-19 |
发明(设计)人: | 彭池方;泮秋立;刘春丽;刘丽强 | 申请(专利权)人: | 江南大学 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 南京利丰知识产权代理事务所(特殊普通合伙) 32256 | 代理人: | 王锋 |
地址: | 214122 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 离子 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种汞离子检测试剂盒,其特征在于包含:
金纳米粒子,用以与Hg2+结合而形成辣根过氧化物模拟酶,
单链核酸,用以与所述金纳米粒子结合而增强所述辣根过氧化物模拟酶的催化活性,
辣根过氧化物酶的特征底物,
以及,辅助试剂,包含在以所述辣根过氧化物模拟酶催化所述氧化特征底物时所需的柠檬酸钠缓冲溶液。
2. 根据权利要求1所述的汞离子检测试剂盒,其特征在于所述金纳米粒子的粒径为15-50 nm。
3. 根据权利要求1所述的汞离子检测试剂盒,其特征在于所述柠檬酸钠缓冲溶液的pH值为4.0-5.0。
4. 根据权利要求1所述的汞离子检测试剂盒,其特征在于所述单链核酸具有SEQ ID No.1所示序列。
5. 根据权利要求1所述的汞离子检测试剂盒,其特征在于所述辣根过氧化物酶的特征底物包括3,4-二羟基苯乙酸、四甲基联苯胺、邻苯二胺或2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐。
6. 一种汞离子检测方法,其特征在于包括如下步骤:
(1)将纳米金溶液、单链核酸溶液与氯化钠溶液充分混合,室温下孵育30 min以上;
(2)取步骤(1)最终所获混合溶液,并分别依次加入辣根过氧化物酶的特征底物、一系列不同浓度的标准 Hg2+溶液和柠檬酸钠缓冲溶液,均匀混合形成混合反应体系,反应10min以上,再分别测定各混合反应体系在可见光波段的吸光值,并获得汞离子浓度-吸光值标准曲线;
(3)取步骤(1)最终所获混合溶液,并依次加入辣根过氧化物酶的特征底物、待测溶液和柠檬酸钠缓冲溶液,均匀混合形成混合反应体系,反应10min以上,再测定该混合反应体系在可见光波段的吸光值,并与所述标准曲线对照,从而测得待测溶液中的Hg2+浓度。
7. 根据权利要求6所述的汞离子检测方法,其特征在于步骤(1)最终所获混合溶液中所含氯化钠的浓度为1.0-3.0 M。
8. 根据权利要求6所述的汞离子检测方法,其特征在于所述柠檬酸钠缓冲溶液的pH值为4.0-5.0。
9. 根据权利要求6所述的汞离子检测方法,其特征在于所述辣根过氧化物酶的特征底物包括3,4-二羟基苯乙酸、四甲基联苯胺、邻苯二胺或2,2-联氮基双(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)二胺盐。
10.根据权利要求6或9所述的汞离子检测方法,其特征在于步骤(2)或步骤(3)中所述混合反应体系中所述特征底物的浓度为0.1 mM-10.0 mM。
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