[发明专利]一种2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸的制备方法有效

专利信息
申请号: 201410421427.9 申请日: 2014-08-25
公开(公告)号: CN105461768B 公开(公告)日: 2018-10-30
发明(设计)人: 张守雨;那可;赵文杰 申请(专利权)人: 上海医药工业研究院;中国医药工业研究总院
主分类号: C07H17/04 分类号: C07H17/04;C07H1/06
代理公司: 上海专利商标事务所有限公司 31100 代理人: 张睿
地址: 200040 上*** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 一种 葡萄糖 抗坏血酸 制备 方法
【说明书】:

本发明公开了一种2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸(AA‑2G)的制备方法,所述方法包括步骤:将含有AA‑2G的溶液与阴离子交换树脂接触并被吸附,用0.01‑0.1mol/L的酸进行洗脱,收集洗脱液得到2‑O‑α‑D‑葡萄糖基‑L‑抗坏血酸(AA‑2G)。

技术领域

本发明涉及分离纯化,尤其涉及一种2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G)的制备方法。

背景技术

AA-2G是一种维生素C的衍生物,具有美白、抗氧化、促进胶原蛋白合成的作用。目前在化妆品、食品和保健品等行业有广泛的应用。在化妆品行业中,AA-2G可以作为美白剂,还原表皮中黑色素;促进胶原蛋白合成,延缓衰老;抗色斑,防止皮肤脂肪过氧化。

目前已报道的AA-2G的分离纯化方法,主要有CN201280010888.6和EP03105024.0。中国专利(CN201280010888.6)公开的方法共有七个操作单元,较为繁琐,而且精制步骤用到柱色谱的操作方法,对设备要求高。欧洲专利(EP03105024.0)公开的洗脱液酸度较高,解吸液pH较低,一方面调节pH会重新引入无机盐杂质(过低的pH会使AA-2G在浓缩过程中降解),不利于后续的浓缩,结晶操作;另一方面产生的废水也不利于环境。此外,这两个专利都使用了阴、阳两种离子交换树脂,树脂再生较繁琐。

因此本领域迫切需要提供一种操作步骤少、离子交换树脂种类少、柱分离洗脱液有利于后续浓缩的AA-2G的制备方法。

发明内容

本发明旨在提供一种从酶转化液中制备高纯度AA-2G的纯化方法。

在本发明中,提供了一种2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G)的制备方法,所述方法包括步骤:

将含有AA-2G的溶液与阴离子交换树脂接触并被吸附,用0.01-0.1mol/L的盐酸进行洗脱,收集洗脱液得到2-O-α-D-葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G)。

在另一优选例中,用于洗脱的酸的浓度为0.01-0.09mol/L;更优选地,酸浓度为0.03-0.08mol/L。

在另一优选例中,含有AA-2G的溶液是将AA-2G的酶转化液经固液分离而得到的澄清液。

在另一优选例中,澄清液中含有的AA-2G经高效液相检测色谱峰纯度为40-60%,更优选为45-55%。

在另一优选例中,所述阴离子交换树脂为大孔强碱型阴离子交换树脂。

在另一优选例中,所述大孔强碱型阴离子交换树脂是中极性的;所述中极性的大孔型阴离子交换树脂的骨架为丙烯酸,主要成分为聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)。

在另一优选例中,用酸洗脱前先用去离子水洗使洗涤液中不含糖。

在另一优选例中,收集AA-2G色谱峰纯度在87%或以上的洗脱液。

在另一优选例中,将收集的AA-2G色谱峰纯度在87%或以上的洗脱液浓缩、降温结晶得到AA-2G晶体。

在另一优选例中,所述方法由下述步骤构成:

(1)将AA-2G的酶转化液经固液分离得到含有AA-2G的澄清液;

(2)将澄清液与阴离子交换树脂接触并被吸附,用去离子水洗涤直至洗涤液中不含糖,再用0.01-0.1N的酸进行洗脱,收集AA-2G色谱峰纯度在87%或以上的洗脱液;和

(3)将收集的AA-2G峰纯度在87%或以上的洗脱液浓缩、降温结晶得到AA-2G晶体。

据此,本发明提供了一种操作步骤少、离子交换树脂种类少、柱分离洗脱液有利于后续浓缩的AA-2G的制备方法。

附图说明

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