[发明专利]核酸序列测定方法及装置、核酸序列测定用元件及其制造方法在审

专利信息
申请号: 201410423060.4 申请日: 2014-08-25
公开(公告)号: CN104419765A 公开(公告)日: 2015-03-18
发明(设计)人: 蓼沼崇;田口朋之;田名网健雄 申请(专利权)人: 横河电机株式会社
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12M1/00;C12M1/34
代理公司: 北京信慧永光知识产权代理有限责任公司 11290 代理人: 周善来;李雪春
地址: 日本*** 国省代码: 日本;JP
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摘要:
搜索关键词: 核酸 序列 测定 方法 装置 元件 及其 制造
【权利要求书】:

1.一种核酸序列测定方法,其特征在于,

所述核酸序列测定方法包括:

制备含有对象核酸的样品溶液;

将所述样品溶液提供给核酸序列测定用元件;以及

测量来自所述核酸序列测定用元件的荧光,

所述核酸序列测定用元件包括:

荧光探针,具有结合部以及基端,并且在规定的位置附加有荧光分子;

消光探针,具有结合部以及基端,并且在规定的位置附加有消光物质;以及

基板,具有固相面,在所述固相面上固定有所述荧光探针以及所述消光探针各自的基端,

所述荧光探针的结合部和所述消光探针的结合部具有相互互补的核酸序列,

所述荧光探针和所述消光探针中的至少一方具有检测部,所述检测部具有与特定的核酸序列互补的核酸序列,

具有下述位置关系的所述荧光探针以及所述消光探针各自的基端固定于所述固相面,所述位置关系为:当所述对象核酸和所述检测部的杂交未产生时,来自所述荧光分子的荧光被接近了所述荧光分子的所述消光物质消光,通过借助了所述结合部的、所述荧光探针和所述消光探针的结合被维持,由此所述消光物质接近了所述荧光分子,当所述对象核酸和所述检测部的杂交产生了时,远离了所述消光物质的所述荧光分子呈现荧光,通过借助了所述结合部的、所述荧光探针和所述消光探针的结合被解除,由此所述荧光分子远离了所述消光物质。

2.根据权利要求1所述的核酸序列测定方法,其特征在于,在所述样品溶液的存在下,对来自所述核酸序列测定用元件的荧光进行测量。

3.一种核酸序列测定用元件,其对样品溶液中所含的对象核酸的核酸序列进行测定,所述核酸序列测定用元件的特征在于,

所述核酸序列测定用元件包括:

荧光探针,具有结合部以及基端,并且在规定的位置附加有荧光分子;

消光探针,具有结合部以及基端,并且在规定的位置附加有消光物质;以及

基板,具有固相面,在所述固相面上固定有所述荧光探针以及所述消光探针各自的基端,

所述荧光探针的结合部和所述消光探针的结合部具有相互互补的核酸序列,

所述荧光探针和所述消光探针中的至少一方具有检测部,所述检测部具有与特定的核酸序列互补的核酸序列,

具有下述位置关系的所述荧光探针以及所述消光探针各自的基端固定于所述固相面,所述位置关系为:当所述对象核酸和所述检测部的杂交未产生时,来自所述荧光分子的荧光被接近了所述荧光分子的所述消光物质消光,通过借助了所述结合部的、所述荧光探针和所述消光探针的结合被维持,由此所述消光物质接近了所述荧光分子,当所述对象核酸和所述检测部的杂交产生了时,远离了所述消光物质的所述荧光分子呈现荧光,通过借助了所述结合部的、所述荧光探针和所述消光探针的结合被解除,由此所述荧光分子远离了所述消光物质。

4.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述荧光探针具有所述检测部。

5.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述基板是平板,所述固相面是所述平板的一个平面。

6.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述基板是球体,所述固相面是所述球体的球面。

7.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述结合部的至少一部分作为所述检测部发挥作用。

8.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述消光探针的数量多于所述荧光探针的数量。

9.根据权利要求8所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述荧光探针的数量与所述消光探针的数量之比为1:3。

10.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,附加有所述荧光分子以及所述消光物质的所述规定的位置,分别是所述荧光探针以及所述消光探针的中途。

11.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,附加有所述荧光分子以及所述消光物质的所述规定的位置有多个。

12.根据权利要求3所述的核酸序列测定用元件,其特征在于,所述荧光探针以及所述消光探针双方具有所述检测部。

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