[发明专利]一组用于鉴定拟谷盗类储粮害虫的引物及其应用

说明书

技术领域

本发明涉及一组引物及其应用；特别涉及一组用于鉴定拟谷盗类储粮害虫的引物及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

拟谷盗隶属于鞘翅目(Coleoptera)、拟步甲科(Tenebrionidae)、拟谷盗属(Tribolium)，该属国内外共记述有30余种，其中为害储粮的拟谷盗约为10种，赤拟谷盗、杂拟谷盗、褐拟谷盗、黑拟谷盗、弗氏拟谷盗和短角拟谷盗这6种在世界范围内分布较为广泛。

拟谷盗属Tribolium Macleay1825是鞘翅目储粮害虫中分布广泛、危害较重，具有重要经济意义的一个类群，在拟谷盗的已知种类中约有10种为储粮害虫，能为害面粉、谷物、玉米、豆类、油料作物等。除我国已报道的3种(赤拟谷盗、杂拟谷盗和弗氏拟谷盗)外，其余7种在我国尚无分布，具有一定的检疫重要性，应提高警惕。这类储粮害虫除直接取食为害外，其成虫体表的臭腺可分泌含苯醌等致癌物质的臭液，使被害物结块、变色、发臭而不能食用，造成严重的经济损失。近年来，随着国际贸易的日益频繁，我国口岸截获拟谷盗的次数也明显增多，对国际贸易的影响日趋严重。面对严峻的国际贸易形势，加强检验检疫工作，对外来有害生物进行节流，抵御检疫性有害生物入侵显得越来越重要。建立方便、快捷、准确的有害生物分类方法对检验检疫工作是非常必要的，在进境植物检疫工作中，害虫的鉴定是一项重要的基础性工作，鉴定的准确性和所需时间直接影响到检疫决策。长期以来，昆虫鉴定都是以外部形态为依据，形态学鉴定虽然具有直观、简便、国际标注统一等优点，但却难以区分具有细微差异的近似种，尤其是非成虫态昆虫，如卵、幼虫和蛹等。拟谷盗因其个体较小(体长约2-7mm)，国内外形态学鉴定专家队伍急剧缩减等特点，开展成虫形态鉴定存在一定困难，非成虫态拟谷盗更是难以进行鉴定，给检疫工作造成很大困难。因此，储粮保护和检验检疫部门急需一种快速、准确、有效的鉴定方法来确定拟谷盗的种类，进而采取有效的害虫防治和检疫除害处理措施。利用现代分子生物学进行昆虫鉴定研究时，基因序列的信息代表了遗传本质，不受标本个体发育状态和环境条件影响，能够提供充分的可定量测度的进化信息，在不同的类群间有较好的可比性，是一种理想的共同尺度。

近几年发展起来的针对昆虫的分子生物学鉴定方法主要包括：随机扩增多态性DNA(RAPD)标记技术、限制性片段长度多态性(RFLP)分析技术、扩增片段长度多态性(AFLP)技术、单链构象多态性(SSCP)分析技术及特异引物PCR技术。相比较其他技术，特异引物PCR技术具有操作简便、灵敏度高、可重复性强等优点，是近缘种昆虫鉴定的理想方法。截至目前，未见应用特异引物PCR技术针对赤拟谷盗、杂拟谷盗、褐拟谷盗、黑拟谷盗、弗氏拟谷盗和短角拟谷盗这6种世界常见拟谷盗类储粮害虫进行分子鉴定的报道。

发明内容

本发明的目的是提供一组用于鉴定拟谷盗类储粮害虫的引物及其应用。

本发明提供一组引物，为如下(1)-(6)所示的引物对中的至少一种：

(1)SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的DNA分子组成的引物对；

(2)SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的DNA分子组成的引物对；

(3)SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的DNA分子组成的引物对；

(4)SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示的DNA分子组成的引物对；

(5)SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示的DNA分子组成的引物对；

(6)SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示的DNA分子组成的引物对。

上述引物中，所述引物由如下(1)-(6)所示的引物对组成：

(1)SEQ ID No.3和SEQ ID No.4所示的DNA分子组成的引物对；

(2)SEQ ID No.5和SEQ ID No.6所示的DNA分子组成的引物对；

(3)SEQ ID No.7和SEQ ID No.8所示的DNA分子组成的引物对；

(4)SEQ ID No.9和SEQ ID No.10所示的DNA分子组成的引物对；

(5)SEQ ID No.11和SEQ ID No.12所示的DNA分子组成的引物对；

(6)SEQ ID No.13和SEQ ID No.14所示的DNA分子组成的引物对。