[发明专利]一种脑靶向水溶性药物负载及其制备方法与应用

说明书

技术领域

本发明属于靶向载体药物技术领域，尤其涉及一种脑靶向水溶性药物负载及其制备方法与应用。

背景技术

随着人口老龄化进程的加剧，全球患有中枢神经系统(central nervous system，CNS)疾病的人数与日俱增。许多神经系统疾病的治疗，需要使治疗药物渗透到整个中枢神经系统。

血脑屏障(blood-brain barrier，BBB)为一个介于血液与脑以及脊髓之间、通透性较低、有选择性通过能力的动态界面。血脑屏障的存在对脑组织形成有效保护，避免有害物质(如毒素和病毒等)的侵害，但也阻碍许多治疗药物进入脑部病灶区，如抗癌药、抗生素和大分子物质(肽类)等。它的存在使98％的药物无法进入脑组织，是制约中枢神经系统药物发展的重要因素。临床上采用的中枢神经系统药物大多是能够扩散通过血脑屏障的小分子脂溶性物质，而这类药物已经远远不能满足临床需要，很多疾病的诊断、治疗需要大分子、水溶性物质。传统的将这类大分子药物导入脑部的方法效果差、危险性大，因此近年来针对能够通过血脑屏障脑部靶向给药技术的研究逐渐成为热点。

目前解决药物有效透过血脑屏障的方法有：制备前体药物、打开血脑屏障紧密结构或使用载体系统如抗体、脂质体、纳米粒等。其中，前体药物存在改变药性、引入毒性的风险，而打开血脑屏障紧密结构有可能引入其他有害物质。相比较来说载体系统成为比较理想的透过血脑屏障的方法。

在载体系统中，低密度脂蛋白LDL被视为脂质体的天然搭档，具有脂质核心，可被应用于药物载体的研究中。LDL作为靶向因子在肿瘤诊断(负载显影剂)、抗肿瘤药物和基因载体等领域得到过应用。

根据治疗因子与LDL复合物形成的方法，主要分为两种类型：1、治疗因子通过疏水链插入LDL磷脂层，从而“锚定”在LDL表面上(“铆钉法”)；2、萃取LDL的类脂体再用脂溶性的药物重组LDL(“重组法”)。其中，“铆钉法”中，含疏水侧链的大分子同样存在“嵌入”LDL可能。Jin-Seok Kim等人研究了由带硬脂基侧链的聚赖氨酸/LDL/DNA所形成的“Terplex”体系作为DNA载体的应用，体系间主要是通过疏水聚赖氨酸、LDL和质粒DNA之间的电荷/疏水力平衡达到稳定，在组成比合适的情况下并不会发生沉淀。这一体系对平滑肌A7R5细胞的转染率甚至超过了Lipofectin相当(高出2.2倍)，在实验中发现“Terplex”的胞吞是经由LDL受体介导的。进一步的实验结果表明，在不同细胞系(CCD-32Lu成纤维细胞)这一体系仍然可以被用作DNA载体。然而需要注意的是，聚合物与LDL之间的比例非常重要，否则会造成聚合物完全覆盖LDL。

“重组法”是将LDL中心的胆固醇脂萃取出来，再把药物填入LDL的磷脂单分子层空壳中。这种“重组法”弊端是工序繁琐，蛋白质收率不高，且整个过程可能会破坏LDL的结构，而且要求对亲水药物进行疏水改性。

以上研究结果显示LDL作为靶向因子的作用主要是LDL表面的载酯蛋白在发挥作用，而如何保护载酯蛋白ApoB-100使其充分暴露在细胞膜受体表面也是LDL实现靶向的关键。

发明内容

本发明的目的在于提供一种脑靶向水溶性药物负载，旨在增强水溶性药物的脑靶向性、增强疗效、降低其毒副作用，并提高其生物利用度。

本发明的另一目的在于提供上述脑靶向水溶性药物负载的制备方法。

本发明的另一目的在于提供上述脑靶向水溶性药物负载的应用。

本发明的另一目的在于提供由上述脑靶向水溶性药物负载制备得到的脑靶向水溶性药物制剂。

本发明的再一目的在于提供上述脑靶向水溶性药物制剂的制备方法。

本发明是这样实现的，一种脑靶向水溶性药物负载，包括药物载体丙炔酰化壳聚糖PA-CS-CHO、叠氮探针N-(2-(2-叠氮乙氧基)乙基)棕榈酰胺NAEP以及LDL；LDL表面组装叠氮探针NAEP，PA-CS-CHO上的炔基与N₃-LDL上的叠氮发生反应形成LDL靶向端作为疏水端的两亲性分子。

优选地，所述丙炔酰化壳聚糖PA-CS-CHO的结构式如下所示：

其中，x的范围为2～30；y′的范围为2～20；z的范围为8～30。

本发明进一步提供了上述脑靶向水溶性药物负载的制备方法，包括以下步骤：