[发明专利]一种蛋白浓度检测试剂盒及其操作方法

权利要求书

1.一种批量蛋白浓度检测试剂盒，其特征在于：包括96孔酶标板、牛血清白蛋白标准品、A液、B液、清洗液和若干0.5mLEP管。

2.根据权利要求1所述的一种批量蛋白浓度检测试剂盒，其特征在于：所述牛血清白蛋白为蛋白粉末，使用前将其配置成所需要的浓度。

3.据权利要求1所述的一种批量蛋白浓度检测试剂盒，其特征在于：所述A液中乙醇含量在20%-50%之间，磷酸含量占50%-75%之间，蒸馏水含量在0-15%之间，考马斯亮蓝G-250含量在0.5mg/mL-2mg/mL之间。

4.据权利要求1所述的一种批量蛋白浓度检测试剂盒，其特征在于：所述B液中乙醇含量在1%-5%之间，磷酸含量在1%-10%之间，蒸馏水含量在85%-98%之间。

5.据权利要求1所述的一种批量蛋白浓度检测试剂盒，其特征在于：所述清洗液是浓度大于80%的乙醇溶液。

6.一种批量蛋白浓度检测试剂盒操作方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：

(1)用蒸馏水将牛血清白蛋白粉末配置成浓度分别为25μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL标准溶液，每种标准溶液配成若干份，分别装在0.5mLEP管中，保存在-20^OC冰箱中；

(2)A液和B液需要按照一定的比例进行混合，A液在混合时所占的比例大约为AB混合液总体积的4%-10%，此后AB混合液需在4^OC下保存；

(3)取出96孔酶标板，在酶标板的孔内加入10-20微升已知浓度的牛血清白蛋白标准品样品和待测样品，保证每孔的加样量相同；

(4)向加过样品的酶标板孔内加入100-180微升的AB混合液，保证每孔加入的混合液量相同，加入后静置5-10分钟；

(5)放入酶标仪中在特定OD595nm波长下或OD450nm和OD630nm叠加波长下进行检测；

(6)检测后将酶标板中的液体倒掉，再在酶标板孔中加入清洗液，加入后手动震荡清洗，倒掉清洗液，反复此步骤2-3次后，再用蒸馏水清洗一次酶标板孔，待酶标板自然晾干后可再次使用。

7.据权利要求6所述的一种蛋白浓度检测试剂盒操作方法，其特征在于，所述已知的牛血清白蛋白标准品加样浓度为：0μg/mL、25μg/mL、50μg/mL、75μg/mL、100μg/mL。