[发明专利]一种千年健的组织培养基及其增殖方法

权利要求书

1.一种千年健的组织培养基，其特征在于根据其增值需要包括了四种培养基，各种培养基的原料及其附加量分别是：

 诱导培养基：以MS为基本培养基，附加蔗糖20～30g/L、琼脂6.5～8.5g/L、6-BA0.5～ 2.0mg/L、2,4-D0.05～0.1mg/L，调节培养基的pH值至5.8；

成苗培养基：以MS为基本培养基，稀释一倍，然后附加蔗糖20～30g/L、琼脂6.5～8.5g/L、6-BA0.5～2.0mg/L、2,4-D0.05～0.1mg/L、质量分数为0.2%—0.3%的符合HG/T3491规定的活性炭粉，调节培养基的pH值至5.8；

叶片培养基：以MS为基本培养基，附加蔗糖20～30g/L、琼脂6.5～8.5g/L、6-BA 0.3～ 1.5mg/L、NAA  0.1～0.2mg/L，调节培养基的pH值至5.8；

叶柄培养基：以MS为基本培养基，附加蔗糖20～30g/L，琼脂6.5～8.0g/L、NAA 0.2～1.0mg/L，调节培养基的pH值至5.8。

2.一种如上所述的千年健的组织培养基进行的增殖方法，其特征是经过以下步骤：

块茎期：将外植体在无菌条件下接种到MS培养基后，置于25℃±2℃，光照强度1500~2000Lx、光照时间为10h/d的环境中；

牙尖期：块茎顶芽长到1cm 时，切下芽尖接种到诱导培养基培养，芽尖可以反复切取直至不能长出新芽尖或已经污染，再将接种好的培养瓶放置在条件适宜的培养架上培养45—55d，形成丛生芽和愈伤组织；

丛生芽+愈伤组织期：丛生芽和愈伤组织转接到成苗培养基上培养25—30天，形成试管苗；

试管苗增殖期：将试管苗浓绿厚大的叶片切成0.5cm×0.5cm的切片，叶面朝上接种于叶片培养基上培养25—30d，回到步骤，将试管苗生长健壮的叶柄切成1cm长小段接种于叶柄培养基上培养45—55d，回到步骤，再将剪掉叶片和叶柄的无菌 小块茎转接到成苗培养基上培养27—33d；回到步骤；

炼苗移栽期：经过数次、步骤的循环增殖，将获得的大量试管苗打开瓶盖在自然光室温下炼苗；

驯化移栽期：将经过炼苗过程的组培苗用自来水洗净后，用遮阳率为75%的遮阳网遮阳，在温度25℃左右，相对湿度85%条件下移栽至土壤种植，用与MS浓度相当的大量元素配制营养液稀释10倍进行喷施。