[发明专利]一种稳定的液体脂类校准品

说明书

技术领域

本发明涉及一种稳定的用于载脂蛋白A-Ⅰ与载脂蛋白B含量测定的校准品，特别是一种稳定的液体脂类校准品。

背景技术

传统的临床检验，要使检验结果可靠或有依据，往往有一个标准品(Standard)。以临床化学检验的比色测定为例，常作三个检测：空白、标准、测定。用空白液调整吸光度为零，读出测定比色液和标准比色液的吸光度，分别为As和Au；已知标准液浓度为Cs。在一定范围内，某分析物浓度和吸光度呈良好比例关系。为了克服纯标准液和病人样品间的基体差异，20年前开始引用具有与病人样品基体相似的校准品替代标准品，用于日常工作。由于以往在使用标准品时不强调它的专用性，国内在应用校准品时忽略了它的专用性。任何方法或仪器、试剂使用一个校准品，严重影响检验质量。

为了克服基体效应，推荐使用校准品。校准品的大多来源为人的样品混合物，如混合血清。本身内含被检分析物，制备时可添加某些分析物增加含量。校准品中被检分析物的含量无法由称量法和容量法确定，只能倚赖于分析方法。校准品的校准值必须取决于分析方法或检测系列。

新鲜病人标本是最佳校准品，由于所有校准品都是处理过的样品，和新鲜病人标本有着基体差异。若使用公认的参考方法去标化测定校准品，测定程序是严密的，测定值是可靠的。但使用该测定值去校准常规的检测系列时，校准品中被检分析物参与反应时的表现明显不同于新鲜病人标本，不能将参考方法系列的准确度通过校准品传递给病人标本。

现有技术中载脂蛋白A-Ⅰ与载脂蛋白B标准品易受干扰，不易保存并且保存时间不长，给临床检验带来了很大的困难。

现阶段，动脉粥样硬化性心血管疾病(atherosclerosis cardiovascular disease，ACVD)包括冠心病、脑卒中和周围动脉疾病。2003年国际动脉粥样硬化学会发表的“预防ACVD临床指南”中确定载脂蛋白异常作为新的ACVD危险因素。而载脂蛋白A-Ⅰ和B异常除了可见于肾肝疾病、糖尿病和内分泌代谢疾病外，主要作为ACVD危险因素，用于ACVD危险程度划分、预防和治疗。由此可见，载脂蛋白A-Ⅰ、B测定结果的准确性取决了整个检测分析系统的稳定可靠，其中校准品的量值溯源和其稳定性在很大程度上影响着测定结果。校准品内载脂蛋白浓度的改变直接导致样本内载脂蛋白的检测值发生错误，失去真实的参考性。

目前，国内生化类体外诊断试剂生产企业研发的用于脂类中载脂蛋白A-Ⅰ和载脂蛋白B校准的校准品，主要是冻干品，这些校准品在复溶后不易保存，而且由于在冻干过程中载脂蛋白的分子结构会遭到破坏，导致载脂蛋白免疫反应性改变。复融后，在高温及反复冻融条件下同样可引起部分分析物质破坏。如果不注意使用会导致校准结果偏高，实际测得病人标本结果也会影响临床判断。国外知名诊断试剂公司像罗氏诊断以及朗道公司研发的血脂校准品，稳定时间长，准确度好,产品可溯源性强，但价格较贵。临床中综合考虑到成本、操作等因素，中小医院使用起来不是很方便。

发明内容

为解决上述问题，本发明公开了一种稳定的液体脂类校准品，通过在含有载脂蛋白A-Ⅰ与载脂蛋白B的血清基质液中添加适量硫代二丙酸、没食子酸丙酯、EDTA和抑肽酶等成份，均能提高载脂蛋白A-Ⅰ与载脂蛋白B的稳定性，由此制成液体脂类校准品，可在2-8℃稳定冷藏一年，并且对载脂蛋白A-Ⅰ与载脂蛋白B具有良好的检测性能，检测精度高，响应效果好。

本发明公开的稳定的液体脂类校准品包括：

作为一种优选，所述缓冲液为Tris缓冲液、MOPS缓冲液、PB缓冲液中的一种，并且缓冲液的酸碱度为PH＝7-8。

作为一种优选，所述稳定剂包括蛋白质类稳定剂或者糖类稳定剂中一种或几种混合物，所述蛋白质类稳定剂为BSA、HGG、HAS中一种或几种，所述糖类稳定剂为蔗糖、葡萄糖、海藻糖中一种或几种。

作为一种优选，所述蛋白酶抑制剂为EDTA、抑肽酶、PMSF中的一种或几种。

作为一种优选，所述抗氧化剂为硫代二丙酸、没食子酸丙酯、丁基羟基茴香醚、二丁基羟基甲苯、叔丁基对苯二酚中的一种或几种。

作为一种优选，所述抗氧化增效剂为柠檬酸、乳酸钠、EDTA中的一种。

作为一种优选，所述防腐剂为叠氮盐类或proclin系列防腐剂，其中叠氮盐类防腐剂主要为NaN₃，proclin系列防腐剂主要为Proclin300。

作为一种优选，本发明公开的稳定的液体脂类校准品主要包括以下组分：