[发明专利]一种羊肚菌杂交菌的菌核培养方法及其在菌种制备的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种羊肚菌菌种制作和菌核培养技术，特别涉及一种优化的菌丝杂交融合操作技术、菌核的高效培养方法及其在菌种制备的应用。

背景技术

羊肚菌Morchella esculenta (L.) Pers 隶属于羊肚菌科(Morchellaceae) 羊肚菌属(Morchella)，是国际著名的珍贵食用菌，世界畅销，是中国主要出口到法国等欧洲国家的食用菌产品。并且随着德、法、意、美等国家对羊肚菌的需求量增大，其价格不断攀升。

羊肚菌最早记载于《本草纲目》，在我国利用的历史悠久。现代科学发现羊肚菌中富含蛋白质、脂肪酸和碳水化合物，特别是多种稀有氨基酸(如顺-3-氨基-L-脯氨酸、2-氨基异丁酸、2, 4-三氨基异丁酸等)、矿质元素(钾、磷、镁、钙、铁、锌、铜、锰等) 和多种维生素(硫胺素、核黄素、尼古酸、泛酸、叶酸、吡哆醇、生物素、抗坏血酸、VB12) 等成分赋予了羊肚菌独特的风味和营养价值，成为国际餐饮中的高档食材。并且，羊肚菌食药同源，现代医学研究表明，羊肚菌能够补肾、补脑、壮阳、提神、降血脂、抗肿瘤等作用。另外，羊肚菌可用于泡酒原料，其液体发酵培养物又可用于调味品的生产等，故其在食品、保健品、医药化工等多领域有着广阔的应用前景。

目前，中国出口的羊肚菌大多采于自然野生，其远远不能满足国内与国际市场的需求，并且野生资源的过度采集造成其产量急剧减少，极大破坏了羊肚菌的生物多样性。因此，羊肚菌的人工或半人工栽培技术一直是国际食用菌研究的热点，栽培试验偶有成功，但其重复性差，出菇不稳定，至今不能进行成熟的商业化栽培。

多年的科学研究表明，在羊肚菌的生活史中，菌核的形成是生长子实体(即出菇) 的必经阶段，而使用杂交菌丝培养出的菌核进行大田中栽培实验最易生长出子实体。实践生产中发现，人工培育羊肚菌菌种时缺乏规范统一且科学高效的菌种杂交方法，并且在菌种制作过程中培养条件的不适宜性经常导致菌种不形成菌核或者菌核消失，造成羊肚菌减产甚至绝收，这是目前羊肚菌(半)人工栽培试验不稳定的两个重要原因。

提供一种优化、高效的羊肚菌杂交菌的菌核多产、稳产培养方法以及杂交菌种制作技术，是本发明力图解决的问题。      

发明内容

本发明的一个目的就是针对羊肚菌制种过程中的杂交效率不高、栽培试验中菌核形成不稳定的不足，提供一种羊肚菌杂交菌的菌核培养方法，该方法操作简便、集约、快捷，菌丝杂交效率高，保障了羊肚菌融合菌丝的获得；进一步根据羊肚菌的生长发育习性，设计了低温、微碱性的培养环境，能够大量培养出羊肚菌菌核，一定程度上保障了羊肚菌大田栽培的成功出菇。

本发明的技术目的是通过如下方案来实现的：

一种羊肚菌杂交菌的菌核培养方法，包括以下步骤：

将不同羊肚菌菌株来源的菌丝块交叉接种于平板培养基的周边，待菌丝杂交形成融合菌丝时，将融合菌丝转接于微碱性培养基，并于低温黑暗条件下培养，得到羊肚菌杂交菌的菌核。

优选的，本发明中，微碱性培养基的pH 值为7.5-8.5，低温暗黑条件下培养的培养温度为10-15℃。培养基pH过高或过低都会降低菌丝生长速度以及减少菌核的形成数量。温度过低影响菌丝生长速度，温度过高不利于形成菌核。

采用培养基pH7.5-8.5，培养温度10-15℃的环境，有利于羊肚菌形成更多稳定的菌核体，减少了以往羊肚菌培养过程中的菌核不形成或者菌核消失退化现象，进而降低了农业损失。