[发明专利]疏花水柏枝愈伤组织和悬浮细胞颗粒的培养方法

权利要求书

1.一种疏花水柏枝（Myricaria laxiflora）植物愈伤组织和悬浮细胞颗粒的生产方法，包括以下步骤：

（1）得到无菌的疏花水柏枝植物体器官，比较得到体系根、茎、叶中全能性最为突出的部位，以及最适应的培养条件；（2）将无菌的茎段接种到愈伤组织培养基中诱导培养15-30天进行愈伤组织的诱导和继代培养，得到以疏花水柏枝组织为原料的愈伤组织，诱导培养基是MS基本培养基+蔗糖 30g/L+琼脂 7.0g/L+PVP 200-500mg/L+6-BA 0.3-0.6mg/L+2,4-D 0.1-0.4mg/L，培养基的pH值为5.9-6.1；（3）将愈伤组织接种到相应的液体培养基中振荡培养或低温培养，得到以疏花水柏枝器官为起源的性状稳定的悬浮细胞颗粒。

2.根据权利要求1所述的一种疏花水柏枝（Myricaria laxiflora）植物愈伤组织和悬浮细胞颗粒的生产方法，其特征在于：步骤（1）所述无菌的疏花水柏枝植物体器官表面消毒方法为75%乙醇30s-2 min，3%-30%NaClO 2min-5min，合适的外植体为疏花水柏枝茎段，适宜的培养基为MS培养基并加入200-500mg/L的PVP。

3.按权利要求1所述的一种疏花水柏枝（Myricaria laxiflora）植物愈伤组织和悬浮细胞颗粒的生产方法，其特征在于：所述的植物疏花水柏枝为柽柳科（Tamaricaceae），水柏枝属 （Myricaria）。

4.根据权利要求1所述的一种疏花水柏枝（Myricaria laxiflora）植物愈伤组织和悬浮细胞颗粒的生产方法，其特征在于：步骤（3）所述的疏花水柏枝悬浮细胞颗粒由如下液体培养基：MS基本培养基+蔗糖 30 g/L+6-BA 0.3-0.6mg/L+2,4-D 0.1-0.4mg/L，培养7-10天开始得到悬浮颗粒，第25-35天获得悬浮细胞。

5.根据权利要求1所述的一种疏花水柏枝（Myricaria laxiflora）植物愈伤组织和悬浮细胞颗粒的生产方法，其特征在于：根据权利要求1所述的培养方法，其特征在于：各步骤中所述的培养条件为：培养温度25℃，光照周期为14h/d；

光照强度采取分段控制： 7:00-8:00，光照强度为1；8:00-9:00，光照强度为2；9:00-19:00，光照强度为3；19:00-20:00，光照强度为2；20:00-21:00，光照强度为3。

6.根据权利要求1所述的一种疏花水柏枝（Myricaria laxiflora）植物愈伤组织和悬浮细胞颗粒的生产方法，其特征是：所述的步骤（3）所述的振荡培养采用120r/min旋转式摇床，摇瓶培养多天后得到细胞悬浮体系。