[发明专利]一种球形芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺

权利要求书

1.一种球形芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺，其特征在于具体步骤如下：

1)一级种子培养：5000ml三角瓶中装有2000ml一级种子培养基，115℃-121℃湿热灭菌15-30min，取10ml球形芽孢杆菌活菌冻干管菌种接种于一级种子培养基中，在28℃-30℃培养12～16h；所用培养基的原料及用量为：葡萄糖0.5％-2.5％，牛肉膏0.5％-3％，蛋白胨0.5％-3％，氯化钠0.5-1％，培养基pH为6.5-7.5；

2)二级种子培养：在400L发酵罐中装有150L或300L二级种子培养基，115℃-121℃湿热灭菌15-30min，将3000ml一级种子接种于二级种子培养基中；在28℃-30℃培养12～16h；所用培养基的原料及用量为：葡萄糖0.5％-2.5％，酵母抽提物0.5％-3％，蛋白胨0.5％-3％，磷酸氢二钾0.02％-0.05％，氯化钠0.5％-1％，硫酸镁0.02％-0.1％，培养基pH调为6.5-7.5；

3)发酵：在5m³或40m³发酵罐中装有4000L或30m³球形芽孢杆菌活菌发酵培养基，115℃-121℃湿热灭菌15-30min，将150L或300L二级种子接种于球形芽孢杆菌活菌发酵培养基中，控制罐压0.02Mpa-0.05Mpa，在28℃-30℃培养40-46h；所用培养基的原料及用量为：葡萄糖1％-3％，豆粕1％-4％，玉米浆1％-4％，酵母粉1％-4％，蛋白胨1％-4％，麦芽浸粉1％-3％，磷酸氢二钾0.01％-0.05％，硫酸镁0.1％-0.2％，硫酸锰0.002％，培养基pH为6.5-7.5；

4)补料：当发酵至12-17h开始流加由葡萄糖20％-60％、水40％-80％配制成的葡萄糖补料培养基，发酵至38-42小时结束；

5)至芽孢形成率大于等于90％时，结束发酵；

6)将发酵液加热到35℃-60℃时进入浓缩器，在真空度为-70kpa～-95kpa下进行浓缩，浓缩至含固量达到10％-25％时，开始出料；

7)浓缩发酵液用多级低温喷雾流化干燥设备进行干燥造粒，颗粒经过分选，符合颗粒要求直接出塔，得效价不少于1000ITU/mg的球形芽孢杆菌产品；所述进风温度130-180℃，出口温度60-80℃；

8)尾气处理：采用化学氧化、等离子照射或紫外照射去味、脱氨氮或脱硫化氢处理后排放。

2.根据权利要求1所述的一种球形芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺，其特征在于一、二级种子培养基，发酵培养基，补料培养基经湿热灭菌后，培养基要迅速降至30℃。

3.根据权利要求1所述的一种球形芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺，其特征在于浓缩器为MVR浓缩器、降膜蒸发器或板式蒸发浓缩器。

4.根据权利要求1所述的一种球形芽孢杆菌活菌制剂的制备工艺，其特征在于采用MVR浓缩器，从蒸发室出来的二次蒸汽经压缩机压缩，压力温度升高至100℃-115℃，送至加热室当加热蒸汽使用，加热发酵液至进料温度，加热蒸汽本身冷凝成水。