[发明专利]多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体有效
申请号: | 201410437843.8 | 申请日: | 2014-08-29 |
公开(公告)号: | CN105018529B | 公开(公告)日: | 2019-01-25 |
发明(设计)人: | 杜子秀;徐宇虹;谢舫;胡凌云;李臻博;金博 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学 |
主分类号: | C12N15/87 | 分类号: | C12N15/87;A61K48/00;A61K9/51 |
代理公司: | 上海汉声知识产权代理有限公司 31236 | 代理人: | 郭国中;陈少凌 |
地址: | 200240 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 多功能 多肽 脂质体 透明 组装 类病毒 核酸 载体 | ||
1.一种多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体,其特征在于,所述类病毒核酸载体是表面带负电荷的具有纳米级的核酸载体;所述类病毒核酸载体的内核是由多功能多肽与阳离子脂质体共混,加入核酸进行自组装形成纳米颗粒;所述类病毒核酸载体的外壳是聚阴离子,所述聚阴离子通过静电作用包裹在所述纳米颗粒的表面;
所述多功能多肽为SEQ ID NO.1或SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。
2.根据权利要求1所述的多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体,其特征在于,所述聚阴离子选自透明质酸、透明质酸钠、羧甲基壳聚糖中的一种或几种。
3.根据权利要求1所述的多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体,其特征在于,所述阳离子脂质体是由阳离子脂质与中性脂质或胆固醇形成的脂质体。
4.根据权利要求3所述的多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体,其特征在于,所述阳离子脂质体具有阳离子双层磷脂膜。
5.根据权利要求1所述的多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体,其特征在于,所述核酸选自DNA、siRNA、microRNA或shRNA。
6.一种根据权利要求1~5中任一项所述的多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
A、通过薄膜分散法制备阳离子脂质体:阳离子脂质与中性脂质或胆固醇水合反应制得阳离子脂质体;
B、纳米载体的制备:将所述阳离子脂质体稀释到5~10μg/mL,与20~40μg/mL的多功能多肽混合后,加入到核酸中,常温孵育,制得表面带正电荷的纳米颗粒;
C、将所述表面带正电荷的纳米颗粒与聚阴离子溶液混合均匀,即得所述多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体。
7.根据权利要求6所述的多功能多肽/脂质体/透明质酸组装的类病毒核酸载体的制备方法,其特征在于,所述阳离子脂质体、多功能多肽、核酸的质量比为(0.5~2):(2~6):1;所述聚阴离子、核酸的质量比为10:1~40:1。
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