[发明专利]梨己糖激酶基因PbHXK1及其应用有效
申请号: | 201410439245.4 | 申请日: | 2014-08-29 |
公开(公告)号: | CN104178502B | 公开(公告)日: | 2017-03-15 |
发明(设计)人: | 张绍铃;赵碧英;黄小三;齐开杰 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | C12N15/54 | 分类号: | C12N15/54;C12N9/12;C12N15/11;C12N15/84;C12N1/21;A01H5/00 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司32218 | 代理人: | 傅婷婷,徐冬涛 |
地址: | 211225 江苏省南京市溧*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 梨己糖 激酶 基因 pbhxk1 及其 应用 | ||
1.一种分离自梨的具有催化己糖磷酸化功能的基因PbHXK1,其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO.1所示,cDNA全长序列为1673bp,包含1497bp的开放阅读框。
2.权利要求1所述的基因PbHXK1编码的蛋白,其氨基酸序列如序列表SEQ ID NO.2所示,编码498个氨基酸,等电点为5.89,分子量为53.9kDa。
3.一种克隆权利要求1或2所述基因cDNA序列的两对引物,第一轮普通PCR引物对的核苷酸序列如下所示:
正向引物PbHXK1-F1:如SEQ ID NO.3所示;
反向引物PbHXK1-R1:如SEQ ID NO.4所示;
第二轮巢式PCR引物对的核苷酸序列如下:
正向引物PbHXK1-F2:如SEQ ID NO.5所示;
反向引物PbHXK1-R2:如SEQ ID NO.6所示。
4.含有权利要求1所述的基因PbHXK1的重组表达载体。
5.根据权利要求4所述的重组表达载体,其特征在于将所述的基因PbHXK1插入到pCAMBIA1301的NcoΙ和BstE II位点之间得到重组表达载体‘PbHXK1-pCAMBIA1301。
6.含有权利要求1所述的基因PbHXK1的基因工程菌。
7.权利要求1所述的基因PbHXK1在调节植株生长和可溶性糖含量中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,构建所述梨己糖激酶基因PbHXK1的植物超表达载体并转化番茄,以野生型番茄植株为对照,获得的转基因番茄植株的PbHXK1基因表达量和己糖激酶活性明显升高,而植株生长受到明显的抑制、可溶性糖含量显著降低。
9.根据权利要求7所述的应用,其特征在于抑制权利要求1所述的基因的表达,可促进植株生长、可溶性糖含量提高。
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