[发明专利]一种快速检测柑橘采后防腐保鲜液中抑霉唑浓度的方法

说明书

技术领域

本发明属于化学和生物学的交叉领域，具体涉及到应用滴定法快速检测柑橘采后腐烂保鲜处理液中抑霉唑的浓度，它适用于柑橘商品化处理生产线杀菌体系中抑霉唑含量的快速检测。

背景技术

柑橘(Citrus)为芸香科柑橘亚科柑橘属植物，是世界第一大果树。据联合国粮食及农业组织(FAO)统计，2011年世界柑橘年产量已经达到1.2亿吨，分布在135个国家和地区，柑橘占世界水果总产量的20.3％。我国是世界柑橘主产国，2011年我国柑橘面积达229万公顷，产量突破2944万吨，仅次于苹果，位居第二。柑橘产值约400亿元，可带动4到5倍的经济产业链，已成为当地‘三农’发展的重要组成部分。据不完全统计，发达国家每年柑橘的采后损失一般在10％-20％，而发展中国家高达20％-40％，我国约在20％-30％左右(程运江，2011，园艺产品贮藏运销学[M]，第二版，北京：中国农业出版社)。柑橘采收后必须经历商品化处理才能发挥更高的经济价值。因此，采后商品化处理过程中杀菌剂处理是十分重要的环节。

化学防治是国内外园艺产品采后贮藏保鲜的主要手段。咪鲜胺、抑霉唑及双胍盐是国内外柑橘采后生产中普遍使用的杀菌剂。多年来我国赣南柑橘产区防腐保鲜剂使用调查统计表明：一个中型果业一次柑橘商品化处理所需保鲜、杀菌剂费用在人民币4000元以上，由于没有一个实用的快速方法监测系统中保鲜、杀菌剂含量，为了保证防腐保鲜效果，一天需彻底更换两次系统中的保鲜、杀菌剂。该企业一天仅是保鲜、杀菌剂就需耗费接近1万元人民币，一年累计耗费在50万元左右。杀菌剂利用率很低，初步估算约60％的杀菌剂随废水排放到环境中，不仅大大增加了生产成本，同时对厂区环境和水源造成的污染也不容忽视。如果有一种快速、简便方法来监测杀菌池中各个杀菌剂的含量，保证其浓度在有效范围内，就可以达到节约成本、降低消耗、提高柑橘采后生产企业经济效益的目的。抑霉唑是当前柑橘采后最常使用的杀菌剂(Altieri.G，A new method for the postharvest application of imazalil fungicide to citrus fruit，Biosystems Engineering，2013，434-443)。目前抑霉唑含量的检测方法，主要包括气相色谱法、高效液相色谱法、色谱串联质谱法等。这几种方法虽然高效、精确度高、检测范围广，但其不仅所需仪器非常昂贵，而且需要专业技术人员操作，该方法目前主要用于果实农药残留的检测，而且对于普通的柑橘采后商品化处理企业也不具备这样的检测条件，目前还没有针对柑橘等水果采后保鲜过程中杀菌剂浓度实时快速检测的简便方法。因此，开发一种简易、经济的防腐保鲜剂检测技术是十分必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种快速检测柑橘采后防腐保鲜液中抑霉唑浓度的方法，该方法快速简单、易操作、成本低。在滴定剂浓度为0.01mol/L时，抑霉唑浓度低至50mg/L仍能被检测出来。

本发明应用滴定快速检测抑霉唑含量的原理:

本方法选用溶于水而成半透明状溶液的十二烷基苯磺酸钠作为滴定剂，靛酚蓝做指示剂，二氯甲烷用作有机相。溶解在二氯甲烷中的抑霉唑经过酸化处理成无色的水溶状态，水溶状态的抑霉唑与滴定剂可以形成溶于有机相中的无色离子对配位化合物，存在于有机相中的指示剂与过量的滴定剂可以形成接近无色的离子对配位化合物。因此这种阴离子表面活性剂双相滴定法可以用来检测抑霉唑的含量。

一种快速检测柑橘采后防腐保鲜液中抑霉唑浓度的方法，其步骤如下：

1、配制滴定剂，用自来水配制浓度为0.01mol/L的十二烷基苯磺酸钠溶液；

2、配制指示剂，称取靛酚蓝(Indophenol Blue)固体粉末，用二氯甲烷配制成0.001mol/L的溶液；

3、配制1mol/L的稀硫酸溶液；

4、量取20ml待测溶液放入三角烧瓶中，加入40ml二氯甲烷，再加入2-3滴氢氧化钠溶液(1mol/L)后加入2-3滴酚酞指示剂(0.5％酚酞乙醇溶液)，上层液变为红色，静置5到10分钟；

5、用分液漏斗分离出下层有机相，首先加入10ml稀硫酸，混合均匀后加入5-10滴靛酚蓝指示剂(0.001mol/L)直到有机相呈现蓝色。

6、用滴定剂滴定至蓝色褪去为滴定终点，读取数据A L。

7、按照以下公式计算样品中抑霉唑的含量。

Y＝74295A

A为滴定终点十二烷基苯磺酸钠使用量(L)

Y为水中抑霉唑含量(mg/L)