[发明专利]一种青藤碱衍生物及其制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及生物技术领域，具体地涉及一种青藤碱衍生物及其制备方法。

背景技术

青藤碱(Sinomenine)是从青藤(SinomeniumAcutumRehderettWilson)的干 燥根提取得到的异喹啉类生物碱。现代药理实验证明，其具有祛风除湿、活血 通络、消炎止痛、利尿消肿的作用，目前多用作抗风湿的特效原料药。长期的 临床药效试验证明其具有抗炎、免疫、镇痛、降压、抗心律失常等多种生理活 性。近年来还有用于治疗慢性肾炎、抗氧化、抗肿瘤、戒毒的报道。青藤碱药 物制剂在临床上用于治疗类风湿性关节炎及心律失常，且取得良好疗效。青藤 碱凝胶制剂在动物透皮吸收及药效试验研究中的结果表明青藤碱对局部前列 腺素(GP)的合成和释放有密切关系。青藤碱还具有选择性抑制环氧化酶 2(COX-2)的作用，这可能是其具有抗炎镇痛作用强而副作用相对较小的主要 机制之一。研究表明青藤碱主要通过调节细胞炎症介质和控制细胞因子合成发 挥抗炎、抗风湿作用，但是，青藤碱在临床上其用药剂量偏大，具有明显的组 胺释放作用，从而引起过敏性副作用，因此，对青藤碱的结构进行修饰与优化， 以寻求高效低毒的新一代青藤碱衍生物具有重要意义。

分枝犁头霉(Absidiaramosa)，属于犁头霉属(Absidia)，其菌丝体与 根霉相似，有匍匐枝和假根，但孢囊梗在匍匐枝中间，不与假根对生。孢囊梗 大多2～5个成簇，常呈轮状或不规则分支枝。孢子囊基部有明显的囊托，囊轴 锥形或半球形。接合孢子着生在匍匐枝上，此属菌广泛分布于土壤、酒曲和各 种粪便中，是制酒生产的污染菌，有些能在37摄氏度生长的种类是人、畜的病 原菌。目前对于分枝犁头霉菌株微生物转化的研究多几种在甾族化合物领域， 为转化甾族化合物的重要菌株。目前还没有分枝犁头霉在微生物转化方面的报 道。

发明内容

本发明的目的是提供一种青藤碱衍生物及其制备方法。

本发明的第一方面提供了一种青藤碱衍生物，其结构如下式I所示：

本发明的另一方面提供了一种青藤碱衍生物的制备方法，包括步骤：

(1)菌体发酵

将分枝犁头霉(Absidiaramosa)接种于培养基中进行液态发酵；

(2)生物转化

发酵分枝犁头霉4-5天后，往发酵液中加入青藤碱，进行生物转化；

(3)分离纯化

生物转化完成后，发酵液固液分离，进行分离纯化。

优选地，步骤(1)中的分枝犁头霉为CGMCC3.3390菌株。

优选地，步骤(1)中的发酵培养过程中培养基中碳源和氮源分别为蔗糖 和大豆粉。

优选地，步骤(1)中发酵培养基中蔗糖含量为2-3％(w/v)，大豆粉含 量为1-2％(w/v)。

优选地，步骤(2)中青藤碱的添加量为0.5-3.0g/L发酵液。

更优选地，步骤(2)中青藤碱的添加量为1-2g/L发酵液。

优选地，步骤(2)中，生物转化过程中的pH为6.5-8.5，更优选地pH为7.5。

优选地，步骤(2)中，转化温度为25-37℃，更优选地为27-30℃。

优选地，步骤(3)中，采用大孔吸附树脂进行分离纯化。

本发明的另一方面提供了青藤碱衍生物的用途，用于制备抗炎、抗病毒、抗 肿瘤、抗细菌感染的药物，其中，所述青藤碱衍生物，其结构如下式I所示：

我们对青藤碱及其衍生无进行了深入而持续的研究，将青藤提取物添加到 分枝犁头霉发酵液中进行培养，意外地发现发酵液中出现了一种新的物质，经 LC-MS检测，在分子量上与青藤碱相比少了一个甲基，经¹HNMR鉴定其结构如式I 所示。虽然该化合物的结构已有报道，但是均为通过化学合成的方法进行制备，本 发明微生物转化方法具有收率高，工艺安全可靠，环境污染少，操作简单方便 等优点，适合进行大规模的工业化生产。

应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施 例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技 术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

附图说明

图1显示了本发明的青藤碱衍生物和标准品HPLC共同检测的图谱。

具体实施方式