[发明专利]一种原壁菌及其应用

说明书

技术领域

本发明属于菌种及其应用领域，特别涉及一种原壁菌及其应用。 

背景技术

颜料红23作为一种色酚系偶氮有机颜料，偶氮颜料是指化学结构中含有偶氮基(-N＝N-)的有机颜料，是纺织品服装在印染工艺中应用最广泛的一类合成染料，用于多种天然和合成纤维的染色和印花，也用于油漆、塑料、橡胶等的着色。作为与人的生活息息相关的一种产品，它是广泛存在的全球性有机污染物，并且在特殊条件下，它能分解产生20多种致癌芳香胺，经过活化作用改变人体的DNA结构引起病变和诱发癌症，颜料工业是高污染行业，废水、废气，固体废物的排放量在石化行业也位居前列，早已成为环保部门重点监察对象，每年都有一些企业因为三废治理不达标而被环保部门实施经济处罚，并被限令停产或减产。可见保护环境、达标治理三废已成为决定企业生死存亡的关键，是稳定与和谐发展的第一要务。颜料企业必须在加强产业发展的同时，更要加大、加强对环保的投入，实现循环经济和可持续发展。偶氮颜料是有机颜料中品种最多和产量最大的一类，因此研究和解决偶氮颜料生产废水的处理方法可以解决大部分颜料化工厂的废水治理问题，具有很强的代表性。 

目前，对颜料废水脱色方法的研究大多都集中在物化处理，这种处理工艺需要使用大量的混凝剂，或者造成用碱量过多，致使运行费用高，产泥量大，出水COD往往不能达标，随着近年来对颜料废水处理研究的增多，出现了光催化、吸附等新型物化处理材料，但对于颜料的物化法处理运行成本通常较高，且容易产生二次污染。从保护环境的角度来看，微生物具有繁殖速度快、适应性强等特点，利用高效脱色微生物进行环境污染治理不仅成本低，且可以减少二次污染的产生。因此，研究偶氮颜料的生物降解性对于评估其在生态环境中的滞留情况以及指导颜料的选用具有重要的现实意义，而且可以为选择合适的颜料生物处理方案提供理论依据。 

由于微生物对环境的适应性强，且污染过程经历一段自然驯化期，因而可以通过驯化从自然环境中筛选到可降解某一污染物的微生物降解菌株。 

发明内容

本发明所要解决的技术问题是提供一种原壁菌及其应用，原壁菌(Prototheca sp.)菌在最适宜条件下：酵母粉浓度为1％，接种量为5％，pH为7.5，温度为35℃，盐度小于4％在此条件下，脱色率达到约92％；菌株耐盐性良好，能在高达8％盐浓度下对染料进行有效脱色。 

本发明的一种原壁菌，原壁菌(Prototheca sp.)ZW-4的保藏编号为CGMCC NO.9400，核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。 

本发明的一种原壁菌的应用，包括： 

(1)在无菌条件下，将Prototheca sp.菌株接种到富集培养基中，置于恒温摇床内培养，然后取富集培养的菌液进行离心，洗涤，配制成1％-15％的菌悬液； 

(2)接种菌悬液于颜料红23脱色培养基中脱色,取10mL反应液，10000r/min，离心6min，取上清液于颜料最大吸收波长λmax＝579nm处测定吸光度A_t,以不接菌的含相同浓度颜料的培养基的吸光度A₀为对照，计算得到脱色率η＝(A₀-At)/A₀×100％。 

所述步骤(1)中富集培养基为10g/L蛋白胨、5g/L酵母粉、10g/LNaCl，蒸馏水1000mL，pH6.8～7.2。 

所述步骤(1)中培养条件为：温度为30℃，摇床转速为150rpm，培养时间为48h。 

所述步骤(1)中离心洗涤为用无菌生理盐水反复洗涤并离心2～3次，离心速率为5000-6000r/min。 

所述步骤(2)中颜料红23脱色培养基为0.1g/LCaCl₂、0.5g/L MgSO₄·7H₂O、1g/LNaCl、1g/LKH₂PO₄、1g/LNa₂HPO₄、10g/L酵母粉、100mg/L颜料红23，蒸馏水1000mL，pH＝6.8～7.2。所述步骤(2)中脱色条件为酵母粉浓度为0.2-2％，接种量为1-15％，pH为4.5-9.5，温度为10-50℃，盐度小于16％。 

所述步骤(2)中脱色条件为酵母粉浓度为1％，接种量为5％，pH为7.5，温度为35℃，盐度小于4％。