[发明专利]橙黄酮的制备方法及其在抗白血病药物中的应用

说明书

技术领域

本发明公开了一种植物提取物的制备方法及应用，特别涉及橙黄酮的制备方法及其在抗白血病药物中的应用。

背景技术

橙黄酮（Aridanin）是从藜科(Chenopodiaceae) 香藜 Chenopodium botrys L.地上部分中提取分离得到的一种黄酮类化合物。分子式为C₂₀H₂₀NO₇，分子量为372.37，mp.169-171℃，结构式为：

 

橙黄酮具有对小鼠髓性白血病细胞有诱导分化活性，浓度为50μM、5μM时，生长率分别为62%和81%(对照100%)，吞噬细胞活性都>10%，浓度为100μM、50μM时，HL-60细胞生长率分别为50%和73%，吞噬细胞活性>25%和>10%；抗肿瘤作用，浓度为30μg/mL时，体外抑制埃氏腹水肿瘤细胞生长，生长抑制率为50%，抑制嗜碱细胞释放由抗原和TPA诱导的组胺，其IC50分别为44和26μM；抑制人单核细胞中白介素-1诱导的组织因子的表达，IC50为10μM；强的15-脂氧化酶抑制剂，抑制亚油酸氢化，IC50为114μM。

白血病是一类造血干细胞恶性克隆性疾病。克隆性白血病细胞因为增殖失控、分化障碍、凋亡受阻等机制在骨髓和其他造血组织中大量增殖累积，并浸润其他组织和器官，同时正常造血受抑制。临床可见不同程度的贫血、出血、感染发热以及肝、脾、淋巴结肿大和骨骼疼痛。据报道，我国各地区白血病的发病率在各种肿瘤中占第六位。

发明内容

为满足临床需要，扩大用药品种，更好地治疗癌症，提供一种橙黄酮的制备方法及其在抗白血病药物中的应用。

为了实现上述目的，本发明采用以下技术方案：

橙黄酮的制备方法，其特征在于包括以下步骤：

（1）取香藜的地上部分，用1%氨水浸泡2-6h，晾干，加入闪式提取器中，以85-95%乙醇溶液为提取溶剂，进行闪式提取，过滤得到提取液；

（2）上述提取液浓缩至浸膏，加氧化铝拌匀、干燥后装柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脱，薄层检测，收集橙黄酮流分，浓缩；

（3）将上述浓缩液采用制备型液相色谱分离，紫外检测器在线监测，收集橙黄酮组分，将洗脱液旋转蒸发浓缩，干燥即得产品。

所述步骤（1）中闪式提取电压为120-160V，提取时间为90s-120s。

所述步骤（2）中氧化铝为80-100目，氯仿-丙酮体积比为1:2，用量为柱体积的5-7倍。

所述步骤（3）中制备型液相色谱的流动相为乙腈-0.15%乙二胺水溶液，体积比为41：59，紫外检测波长为254nm。

所述制备的橙黄酮，在制备抗白血病药物中的应用，尤其在制备防治淋巴性白血病和髓细胞白血病的应用。

所述制备的橙黄酮，在其口服配方中添加肠吸收促进剂，包含中链脂肪酸盐、胆酸盐、鹅去氧胆酸盐、壳聚糖及其衍生物中的一种或几种。

采用本法制备橙黄酮，工艺简便易操作，制备量大，产品得率高，而且低污染；添加肠吸收促进剂，有利于提高生物利用度。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式

实施例1：

橙黄酮的制备

取香藜的地上部分200g，用1%氨水浸泡4h，晾干，加入闪式提取器中，以90%乙醇溶液为提取溶剂，提取电压为120V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液减压回收试剂得浸膏，向浸膏中加氧化铝（100目）拌匀、干燥后装柱，用7倍柱体积的氯仿-丙酮（1:2）混合溶液洗脱，薄层检测，收集橙黄酮流分，浓缩得浓缩液。将浓缩液加入甲醇至刚好溶解，溶解后的溶液经0.45μm微滤膜过滤，得到样品溶液取滤液进样，以乙腈-0.15%乙二胺水溶液为流动相，体积比为41：59，色谱柱以C8键合相为填料，粒径为10μm，柱长为15cm、直径为4cm，六通阀进样，进样体积为25ml，控制流速为50ml/min，紫外在线检测，检测波长为254nm，收集目标成分，减压回收试剂得橙黄酮42mg，经HPLC检测，纯度96.5%。

实施例2：

橙黄酮的制备