[发明专利]一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种从三尖杉中提取三尖杉碱的方法，尤其涉及一种超声波-微波提取三尖杉碱的方法，属于中药有效成分分离领域。

背景技术

三尖杉碱，分子式C₁₈H₂₁NO₄，白色晶体，m.p132~133℃，广泛存在于三尖杉属植物的根、、茎、叶、干和果实中，占三尖杉属植物所含生物总碱的40~80%，它是抗癌新药-三尖杉酯碱和高三尖杉酯碱的母体，由于它独特的五元稠环结构，具有显著的抗癌作用，临床治疗恶性肿瘤的有效率为32.4%（特别是慢性白血病）。

目前关于三尖杉碱的合成文献较多，如叶仙蓉报道的“三尖杉碱和桥氧三尖杉碱衍生物的合成及抗肿瘤活性”一文，该合成路线冗长，不能用于规模化的生产；而从三尖杉属植物中分离提纯三尖杉碱的文献及专利较少，且需要高效液相制备色谱分离，以及三氯甲烷、苯等有毒试剂，不适于工业化生产。

发明内容

本发明的目的是提供一种工艺简单、易操作、快速、高效的提取三尖杉碱的方法。

本发明包括以下步骤：

a.三尖杉根茎粉碎，过100目筛；

b.取三尖杉粗粉，加入8~10倍的70~80%的乙醇溶液，调节PH值为3.0~4.0，置于超声-微波提取装置中，超声波600W（常开），微波功率为400~500W，提取时间为90~120min；

c.将上述的提取液离心，取上清液，碱调PH值至9~11，直接通过三氧化二铝柱吸附，乙醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止；

d.浓缩洗脱液，用氯仿萃取2~3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品；

e.无水乙醇重结晶2次，即得三尖杉碱纯品。

步骤b中所述的调节PH的酸为柠檬酸或盐酸。

步骤c中所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、碳酸钠等。

本发明利用超声波-微波协同提取药材有效成分的工艺充分利用了超声振动的空化作用以及微波的高能作用，超声可破坏药材的细胞，使溶剂易于渗入细胞内，同时超声波的强烈振动能传递巨大能量给浸提的药材和溶剂，使它们做高速运动，加强了胞内物质的释放、扩散和溶解；而微波的高能作用，使样品介质内的各点受到的作用一致，加速目标物从固相进入溶剂的过程。该方法具有高效性和强选择性，操作简单，产率高，成本低等优点。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

三尖杉枝叶粉碎，过100目筛，取三尖杉粗粉1kg，加入8倍的70%的乙醇溶液，盐酸调节PH值为3.0，置于超声-微波提取装置中，超声波600W（常开），微波功率为400W，提取时间为90min，提取液离心，取上清液，氢氧化钠调PH值至9，直接通过三氧化二铝柱吸附，乙醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止，浓缩洗脱液，用氯仿萃取3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品，无水乙醇重结晶2次，即得白色晶体三尖杉碱1.85g，经检测，光学纯度为90.1%。

实施例2：

三尖杉枝叶粉碎，过100目筛，取三尖杉粗粉1kg，加入9倍的80%的乙醇溶液，盐酸调节PH值为4.0，置于超声-微波提取装置中，超声波600W（常开），微波功率为450W，提取时间为110min，提取液离心，取上清液，氢氧化钠调PH值至10，直接通过三氧化二铝柱吸附，乙醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止，浓缩洗脱液，用氯仿萃取3次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品，无水乙醇重结晶2次，即得白色晶体三尖杉碱1.90g，经检测，光学纯度为93.2%。

实施例3：

三尖杉枝叶粉碎，过100目筛，取三尖杉粗粉1kg，加入10倍的75%的乙醇溶液，柠檬酸调节PH值为3.5，置于超声-微波提取装置中，超声波600W（常开），微波功率为500W，提取时间为120min，提取液离心，取上清液，氢氧化钠调PH值至11，直接通过三氧化二铝柱吸附，乙醚洗脱，流速为10mL/min，至流出洗脱液无生物碱反应为止，浓缩洗脱液，用氯仿萃取2次，无水硫酸钠干燥，减压浓缩得三尖杉碱粗品，无水乙醇重结晶2次，即得白色晶体三尖杉碱1.86g，经检测，光学纯度为92.5%。