[发明专利]一种检测或辅助检测疫霉属菌的方法无效

专利信息
申请号: 201410447844.0 申请日: 2014-09-04
公开(公告)号: CN104178576A 公开(公告)日: 2014-12-03
发明(设计)人: 粟寒;张勇;王振华;杨静;缪爱斌;李彬;吴翠萍 申请(专利权)人: 江苏出入境检验检疫局动植物与食品检测中心;中华人民共和国南京出入境检验检疫局;湖北出入境检验检疫局检验检疫技术中心
主分类号: C12Q1/68 分类号: C12Q1/68;C12Q1/04;C12R1/645
代理公司: 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 代理人: 袁静
地址: 210001*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 检测 辅助 疫霉属菌 方法
【权利要求书】:

1.一种检测或辅助检测疫霉属菌的方法,包括如下步骤:

(1)下载已经公开的疫霉菌属菌的DNA条形码序列;

(2)将疫霉菌属各菌的DNA条形码序列进行多重序列比对,找出每个种的特异性碱基位点,同时得到一致性序列;所述每个种的特异性碱基位点包括差异性碱基位点、SNP位点,所述差异性碱基位点是指DNA条形码序列在种内相同、种间不同的碱基位点,所述SNP位点为种内各菌株DNA条形码序列分别与属内除自身菌株外其他菌株DNA条形码序列均不同的碱基位点;

(3)将待测菌的DNA条形码序列与一致性序列进行比对,在缺失位点插入“-”调整待测菌的DNA条形码序列长度等同于一致性序列,调整长度后的序列为定位序列;

(4)将定位序列与每个种的特异性碱基位点进行比对,按照函数                                                对待测菌与各种的碱基相似度进行打分,其中score(i)表示定位序列与i种的特异性碱基位点比对得分值,i表示疫霉菌属的某个种,j表示定位序列中的碱基位点,pij表示定位序列在碱基位点j处的分值,当j为SNP位点时,如果定位序列在j处碱基与SNP位点碱基相同,则pij为3,否则pij为-3;当j为差异性碱基位点时,如果定位序列在j处碱基与差异性碱基位点碱基相同时,pij为1,否则pij为-1;当j为其他位点时,pij为0;所述为所有碱基位点的pij分值之和;

(5)取score(i)最大值,待测菌隶属于score(i)最大值对应的种。

2.根据权利要求1所述检测或辅助检测疫霉属菌的方法,其特征在于所述DNA条形码序列选自cox2 编码基因或ITS编码基因;所述DNA条形码序列为28s rRNA、60S Ribosomal Protein编码基因中的一种和cox2编码基因;所述DNA条形码序列为28s rRNA、60S Ribosomal Protein编码基因中的一种和ITS编码基因。

3.根据权利要求1或2所述检测或辅助检测疫霉属菌的方法,其特征在于步骤(2)中所述多重序列比对采用MEGA软件。

4.根据权利要求3所述检测或辅助检测疫霉属菌的方法,其特征在于步骤(3)将待测菌的DNA条形码序列与一致性序列进行比对采用Blast软件。

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