[发明专利]一种紫苏总黄酮的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种紫苏总黄酮的制备方法，属于中药有效成分提取领域。

背景技术

紫苏叶为唇形科植物紫苏的叶，又称苏叶，为一年生草本植物。其含有多种化学成分，如花色素苷、黄酮、黄酮苷等16种黄酮类化合物，以及迷迭香酸、紫苏醛、紫苏酮、榄香素、石竹烯等。

黄酮类化合物是指基本母核为2-苯基色原酮的系列化合物，广泛存在于植物界，是许多中草药的有效成分，种类繁多，具有多种生物活性，除具有抗菌、消炎、抗病变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显著效果，是一种重要的具有开发前景的天然有机抗氧化剂。近年来黄酮类化合物的研究倾向于其药用价值的开发，更多地涉及提取工艺的应用研究、黄酮类化合物的含量测定及制剂制备。

目前国内外黄酮的提取、纯化方法主要有：回流提取法、超临界流体萃取法、聚酰胺柱层析法等。这些方法均存在诸多不足：回流提取法，具有耗时长、有效成分提取率低、操作复杂的缺点；超临界流体萃取法虽然具有无溶剂残留、提取率高、环保等优点，但其提取条件苛刻，设备昂贵，维修困难，不适合工业化生产；而聚酰胺纯化法对黄酮类成分的不可逆吸附值高，其得率低，且洗脱麻烦。

发明内容

本发明是针对现有技术的不足，旨在提供一种高效性和选择性、操作简便、产率高、副产物少、可工业化实现的制备紫苏总黄酮的方法。

本发明的技术方案按照下列步骤进行：

a.将紫苏叶阴干，粉碎；

b.向上述原料中加入原料重量1~2%的复合酶，混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于30~40℃发酵3~5天；

c.取出，加入3~5倍的50~70%的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率400~600W的条件下萃取20~40min，过滤，滤液减压浓缩，回收乙醇，得浓缩液；

d.将所得浓缩液上大孔树脂柱，经4~6倍树脂体积的60~70%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮。

步骤b中所述的复合酶为比例0.5:0.3:0.2的纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶的混合物。

步骤d中所述的树脂用量与原料的质量比为1:1。

步骤d中所述的大孔树脂类型为HPD-100、HPD-400、AB-8。

黄酮类化合物是胞内物质，选用复合酶来分解构成细胞壁和细胞质的纤维素、半纤维素和果胶质，使其细胞壁水解破裂，从而增大了有效成分的扩散面积，有利于细胞内物质的溶出。而微波是一种超高速电磁波，具有很强的穿透作用，使植物细胞中的水分或有机溶剂迅速升温升压，细胞壁穿孔，使成分从细胞中溶出，以增加紫苏中有效成分在溶剂中的溶解，而且微波电磁场使分子运动短时间内加剧，从而缩短了时间，提高了提取率。本发明利用酶法和微波提取两种技术联用，优势互补，大大地提高了紫苏总黄酮的提取率，再结合大孔吸附树脂的纯化技术，即可得到高得率、高含量的紫苏总黄酮。

下面将结合具体实施方式进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量1%的复合酶（纤维素酶：半纤维素酶：果胶酶=0.5:0.3:0.2），混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于30℃发酵3天。取出，加入3倍的50%的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率400W的条件下萃取20min，萃取液减压浓缩，回收乙醇，将所得浓缩液加入与原料等质量的HPD-100大孔树脂柱，经4倍树脂体积的60%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮，提取率为80.1%，经UV检测，总黄酮的含量为70.6%。

实施例2：

将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量2%的复合酶（纤维素酶：半纤维素酶：果胶酶=0.5:0.3:0.2），混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于40℃发酵4天。取出，加入4倍的60%的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率500W的条件下萃取30min，萃取液减压浓缩，回收乙醇，将所得浓缩液加入与原料等质量的AB-8大孔树脂柱，经5倍树脂体积的70%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮，提取率为85.2%，经UV检测，总黄酮的含量为75.4%。

实施例3：

将紫苏叶阴干，粉碎，加入原料重量1.5%的复合酶（纤维素酶：半纤维素酶：果胶酶=0.5:0.3:0.2），混合均匀，喷洒蒸馏水，达到手握成团即可，薄膜包裹，于35℃发酵5天。取出，加入5倍的70%的乙醇溶液，进行微波萃取，于功率600W的条件下萃取40min，萃取液减压浓缩，回收乙醇，将所得浓缩液加入与原料等质量的HPD-400大孔树脂上柱，经6倍树脂体积的65%的洗脱，收集洗脱液，浓缩、干燥，获得紫苏总黄酮，提取率为83.1%，经UV检测，总黄酮的含量为75.2%。