[发明专利]Non-B Ig单抗RP215在判定肺癌肿瘤分化、转移和预后中的应用

说明书

技术领域

本发明属于生物医学技术领域，涉及特异性识别人非B细胞来源免疫球蛋白分子重链可变区的单克隆抗体RP215在判定肺癌及其他肿瘤分化程度、转移情况以及预后中的应用。本发明同时涉及一种检测肺癌分化，转移及预后的免疫组化试剂盒。

背景技术

一，肺癌诊断及预后标志物研究现状

肺癌是世界上死亡率最高的疾病之一，每年大概有100万人死于肺癌。虽然在过去的数十年中，针对肺癌的研究有了巨大进展，但肺癌病人的五年生存率仍然很低。目前肿瘤结节转移（TNM）分期系统是国际上广泛认可的，用于对肺癌进行预后分析的方法。但TNM分期并不能很准确的预测肺癌病人的生存期，这就使得寻找更好，更有效的预后标志物成为必需。经过多年的研究，目前，人们已经发现了一些肺癌相关的标志分子，例如，生物分子p63，p40和角蛋白5/6（CK5/6）可作为肺鳞癌的诊断标志物；甲状腺转录因子1（TTF-1）,和天门冬氨酸蛋白酶A（NapsinA）可用于肺腺癌的诊断等。但这些标志分子在预测肺癌病人生存率上准确性仍然很低。因此，寻找更有效的肺癌预后标志物，已成为肺癌治疗的当务之急。

二，非B细胞免疫球蛋白研究现状

传统的免疫学理论认为免疫球蛋白基因仅在B淋巴细胞发育过程中进行选择性重排，故免疫球蛋白是B淋巴细胞的特征性产物。但1996年，邱晓彦等通过免疫组化、WesternBlot等发现在多种上皮性恶性肿瘤细胞的胞浆中存在与免疫球蛋白抗原性相同且分子结构相似的蛋白分子，而其它正常上皮细胞均为阴性反应（中国免疫学杂志；1996，5：296）;随后邱晓彦等又分别从蛋白水平和mRNA水平证实Ig分子在非B细胞来源的肿瘤细胞中表达；并且发现应用Ig特异的反义寡核苷酸以及抗Ig抗体都可诱导肿瘤细胞凋亡、抑制其生长（CANCERRESEARCH63,6488–6495,October1,2003）。目前，我们课题组对于肿瘤来源Ig生物学活性的研究已有了很大发展。我们的研究发现，体外利用ASODN或抗人IgG抗体来抑制肿瘤来源IgG可增加细胞程序性凋亡，抑制细胞生长。在裸鼠体内实验中，抗人IgG抗体可以抑制分泌IgG的癌细胞系HelaMR的生长。而且，不只是肿瘤细胞，一些增殖旺盛的上皮细胞也会表达Ig，增生的乳腺细胞、肝硬化中增殖的肝细胞和癌巢周围的上皮组织中均有Ig分布。在癌前病变中Ig的表达出现上调，说明肿瘤细胞分泌的Ig可能对癌症的发生有重要作用，具有促进肿瘤细胞生长和维持其生存的作用。目前上述发现已经得到国内外几个课题组的证实和认可（CancerRes,2006.66(8):p.3996-4000；CancerBiomark.,2009.5(4):p.177-188）。但在过去的10年里，我们课题组及其他的课题组都应用以循环血Ig分子作为免疫原制备的单克隆或多克隆抗体（商品化），通过免疫组化、Westernblot等方法发现了Ig分子、特别是IgG分子在多种非免疫细胞来源的肿瘤组织及一些正常组织细胞中高表达。但用该类抗体没有发现IgG在正常组织中上皮的基底细胞及胆管上皮细胞等具有强分裂能力及迁移能力的细胞及肿瘤肝细胞中高水平表达，并参与细胞迁移及干细胞的功能。

三，RP215来源及研究现状