[发明专利]一种利用幼胚拯救实现小豆和饭豆远缘杂交的方法

权利要求书

1.一种利用幼胚拯救实现小豆和饭豆远缘杂交的方法，其特征在于包括以下步骤：

1)材料准备：母本选用较早熟的饭豆材料，父本选用综合性状优良的小豆品种，精选无病饱满的籽粒以备种植；

2)材料种植：小豆亲本分批错期播种，以保证两亲本花期相遇并有足够的花蕾进行杂交；

3)杂交授粉：当父母本均开花时，于每天下午4-6时进行去雄，第二天7-9时进行授粉；

4)幼胚拯救：取授粉后10-15天的杂交荚，用蒸馏水将杂交荚表面清洗干净，用尖头镊子将其剥开，取幼嫩籽粒；将幼嫩的杂交籽粒用70％酒精灭菌1分钟，0.1％升汞灭菌15分钟，灭菌蒸馏水冲洗3-5次；在解剖镜下剥取幼胚，将幼胚接种于装有灭菌培养基的组培瓶中，其中培养基为添加10μM6-苄基腺嘌呤的MS基本培养基，以上整个操作过程在超净工作台中完成；接种好的幼胚转移到光照培养箱中，培养条件为温度25℃，湿度55-65％，12小时光照，12小时暗环境，直至杂种幼苗长出；

5)杂种幼苗移栽。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的母本为从播种至开花期为50-60天的饭豆材料，所述的父本为综合性状较好的吉林省小豆品种白红2号。

3.如权利要求2所述的方法，其特征在于所述的母本为河北保定的较早熟的饭豆亲本材料F021。

4.如权利要求2所述的方法，其特征在于小豆亲本材料白红2号分两批错期播种，第一批与饭豆材料同期播种，第二批错后3-15天播种，以保证两亲本花期相遇并有足够的花蕾进行杂交。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的杂交授粉的具体操作方法为选取第二天即将开放的花蕾，用酒精消毒过的尖头镊子剥开龙骨瓣，将10个花药全部去除，仅留柱头；去雄后将整个植株罩上防虫网，以防昆虫传粉，授粉时选取当天刚开放的花朵，用尖头镊子将整个包含柱头、花药和花丝的龙骨瓣取下，从龙骨瓣细的开口一端将其套在母本的柱头上。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于所述的杂种幼苗移栽包括待幼苗长至8-12厘米高且生根良好时，打开培养瓶口，炼苗48小时；炼苗结束后小心地用镊子将幼苗从组培瓶中取出，洗净根上残留的培养基，将其移栽到花盆中，将整个花盆用透光性好的聚乙烯袋罩上，以保持高湿环境，促进幼苗成活。