[发明专利]完整获取组织内核糖体新生肽链复合物的方法

说明书

技术领域

本发明属于生命科学技术领域，特别涉及一种完整获取组织内核糖体新生肽链复合物(Ribosome Nascent-chain Complex，RNC)的方法。

背景技术

翻译调控是生命体内的重要调控层次。在细胞中有的基因翻译多、有的基因翻译少，有的基因根本就不被翻译。因此对细胞中的翻译状况进行研究显得极为必要。细胞进行翻译时，核糖体结合在mRNA链上并移动，依据mRNA上的三联密码子信息来逐步合成蛋白质多肽链(称为新生肽链，nascent-chain)。这一复合物称为核糖体新生肽链复合物(Ribosome Nascent-chain Complex,RNC)。只有完整提取了RNC，才能对正在翻译的mRNA进行定性定量研究，因此，完整提取得到RNC对研究和应用都有重要的意义。对正在翻译的mRNA进行测定(翻译组测序)，可用正在翻译的mRNA的含量推算蛋白质的含量(Wang et al.Translating mRNAs strongly correlate to proteins in a multivariate manner and their translation ratios are phenotype specific.Nucleic acids research 41,4743-4754,2013)，可计算翻译效率从而表征细胞的各种表型(Wang et al.,2013，文献前面已提过，此处略，下文中，只要是简写的，均为文献名称已在背景技术提及过)，可以发现未知蛋白(Zhang et al.How to discover new proteins-translatome profiling.Science China Life sciences 57,358-360，2014b)，对蛋白质组研究也有重要的指导意义(Chang et al.Systematic analyses of the transcriptome,translatome,and proteome provide a global view and potential strategy for the C-HPP.Journal of proteome research 13,38-49，2014；Liu et al.Chromosome-8-coded proteome of Chinese Chromosome Proteome Data set(CCPD)2.0 with partial immunohistochemical verifications.Journal of proteome research 13,126-136,2014；Wang et al.Omics evidence:single nucleotide variants transmissions on chromosome 20 in liver cancer cell lines.Journal of proteome research 13,200-211,2014；Zhang et al.Systematic analysis of missing proteins provides clues to help define all of the protein-coding genes on human chromosome 1.Journal of proteome research 13,114-125,2014a；Zhong et al.Resolving chromosome-centric human proteome with translating mRNA analysis:a strategic demonstration.Journal of proteome research 13,50-59，2014)，被列为人类蛋白质组计划的第四支柱(Zhong et al.，2014)。