[发明专利]一种肉品中硝基呋喃类药物代谢物的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种药物残留检测的监测方法，尤其涉及一种肉品中硝基呋喃类药物代谢物的检测方法。 

背景技术

目前，农业部193号公告明确规定硝基呋喃类药物严禁用于食用动物，但因为其在治疗肠道细菌感染等方面疗效明显，并且价格低廉，在畜禽养殖中还存在非法使用。硝基呋喃类药物残留主要检测其代谢物：3-氨基-2-唑烷基酮(AOZ)、5-甲基吗啉-3-氨基-2-唑烷基酮(AMOZ)、氨基脲(SEM)、1-氨基乙内酰脲(AHD)。大部分硝基呋喃代谢物与蛋白结合紧密，只有小部分以游离态形式存在，其水解衍生化是检测的关键环节。 

目前检测硝基呋喃类药物代谢物残留的代表性的方法主要有： 

(1)“GB/T 20752-2006猪肉、牛肉、鸡肉、猪肝和水产品中硝基呋喃类代谢物残留量的测定液相色谱-串联质谱法” 

(2)酶联免疫法 

(3)《中华人民共和国国家标准农业部1077号公告-2-2008》“水产品中硝基呋喃类代谢物残留量-高效液相色谱法” 

上述方法(1)和(2)的前处理，均需要经过16小时的水解衍生化过程。方法(3)只用于检测水产品中的代谢物，并且试剂较为复杂，不能对鸡肉、猪肉，动物肝脏等动物源性食品中硝基呋喃代谢物进行准确的检测。 

发明内容

本发明旨在解决现有技术只能检测水产品中的代谢物，并且试剂较为复 杂，不能对鸡肉、猪肉，动物肝脏等动物源性食品中硝基呋喃代谢物进行准确的检测的问题，进而提出一种可以快速检测硝基呋喃类药物代谢物残留的检测方法。 

本申请提供了一种肉品中硝基呋喃类药物代谢物的检测方法，该检测方法包括以下步骤： 

(1)前处理 

将样品放入前处理液中振荡，然后离心分离，去清液，得到固体残渣； 

(2)所述固体残渣的处理 

样品固体残渣提取液中加入衍生化剂，在加热、酸性条件下进行衍生化处理，衍生化完成后冷却、调节pH至中性，再离心取得上清液，再将所述上清液通过固相萃取柱，然后用淋洗液进行淋洗，再用洗脱液进行洗脱处理，得到洗脱液，所述洗脱液浓缩干燥，再用复溶液进行复溶，便得样品溶液。 

其中，在进行所述衍生化处理时，所述提取液中所述衍生化剂的浓度为0.1mmol/L。 

其中，所述衍生化剂为2-硝基苯甲醛的二甲基亚砜溶液。 

其中，所述衍生化处理的条件为：在惰性气体保护的条件下进行所述衍生化处理，pH为0.9-1.1，温度为90-104℃，时间为30-60分钟。 

其中，所述冷却的温度为0-15℃。 

其中，在将所述上清液通过固相萃取柱之前还包括以下步骤：使用过滤器对所述样品溶液进行过滤。 

其中，所述萃取液为甲醇的水溶液，甲醇体积含量为50％-90％。 

其中，所述淋洗液为水， 

所述洗脱液为乙酸乙酯， 

所述复溶液为氨水的甲醇溶液。 

其中，所述固相萃取柱为亲脂亲水平衡体反相萃取柱。 

其中，所述硝基呋喃类药物代谢物为呋喃唑酮代谢物、呋喃它酮代谢物、 呋喃西林代谢物和呋喃妥因代谢物中的一种或几种。 

与有关技术相比，本发明实施例的有益效果如下： 

(1)本发明实施例的肉品中硝基呋喃类药物代谢物的检测方法，适用于各种动物源性样品，样品先用甲醇/水洗后，再检测样品固体残渣中结合态的硝基呋喃代谢物，并且所使用的水解衍生化剂进行衍生化前处理，可以将硝基呋喃类药物代谢物残留检测的水解衍生化过程缩短至30-60分钟，整个检测过程缩短到60-120分钟。 

(2)本发明实施例的肉品中硝基呋喃类药物代谢物的检测方法，前处理过程适合于猪、牛、鸡等动物的肌肉、肝、肾等组织以及鸡蛋、水产品等动物源性食品。 

(3)本发明实施例的肉品中硝基呋喃类药物代谢物的检测方法，试剂和反应条件相对简单，使残留检测的前处理更为方便、高效、标准。 

具体实施方式

下文中将对本发明的实施例进行详细说明。需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互任意组合。 

实施例1 

(1)前处理 

称量2g均质好的样品(猪肉)在带盖的离心管中；加入10ml甲醇/水溶液(甲醇含量70％)，混匀，离心，弃去上清液，样品固体残渣留作下一步处理用。 

(2)衍生化处理