[发明专利]一种多级连续发酵生产丁二酸的方法无效

专利信息
申请号: 201410459744.X 申请日: 2014-09-11
公开(公告)号: CN104152497A 公开(公告)日: 2014-11-19
发明(设计)人: 陈可泉;王震;何珣;肖文;欧阳平凯 申请(专利权)人: 南京工业大学
主分类号: C12P7/46 分类号: C12P7/46;C12R1/01
代理公司: 南京经纬专利商标代理有限公司 32200 代理人: 李纪昌;曹翠珍
地址: 211816 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 一种 多级 连续发酵 生产 丁二酸 方法
【权利要求书】:

1.一种多级连续发酵生产丁二酸的方法,其特征在于,包括以下步骤:

第一步,配种子培养基、初始发酵培养基、碳源补料罐培养液和培养基补料罐培养液;

第二步,对发酵罐、碳源补料罐、培养基补料罐、种子培养基、初始发酵培养基、碳源补料罐培养液、培养基补料罐培养液以及血清瓶进行灭菌处理;

第三步,取灭菌后的血清瓶,接入灭菌后的种子培养基,通入CO2后再接入产琥珀酸放线杆菌(Actinobacillus succinogenes )NJ113摇床培养后作为发酵菌种;

第四步,多级连续发酵,将灭菌后的发酵罐串联后,在一级发酵罐中接入初始发酵培养基,通入气体,再按照接种量体积比为3-10%接入发酵菌种,初始发酵培养基从一级发酵罐流入二级发酵罐、三级发酵罐,依次流到最后一级发酵罐中,通过调节通气量、一级发酵罐的初糖浓度、各级发酵罐的补糖速率、发酵液流出速率和发酵液流入速率控制各级发酵罐内的糖浓度,通过控制各级发酵罐中细胞生物量和细胞回流速率来完成丁二酸的发酵,发酵全程pH为6.5-7.5,温度为35-40℃进行50-750h。

2.根据权利要求1所述多级连续发酵生产丁二酸的方法,其特征在于:

    当发酵罐数量为3个时,该三级发酵罐各级罐内糖浓度为:一级:90%-80%残糖;二级:60%-45%残糖;三级:15%-0%残糖;

    当发酵罐数量为4个时,该四级发酵罐各级罐内糖浓度为:一级:95%-85%残糖;二级:70%-55%残糖;三级:40%-25%残糖;四级:15%-0%残糖;

    当发酵罐数量为5个时,该五级发酵罐各级罐内糖浓度为:一级:95%-85%残糖;二级:75%-60%残糖;三级:55%-40%残糖;四级:35%-20%残糖;五级:15%-0%残糖;

   当发酵罐数量为6个时,该六级发酵罐各级罐内糖浓度为:一级:95%-90%残糖;二级:80%-70%残糖;三级:70%-60%残糖;四级:50%-40%残糖;五级:30%-20%残糖;六级:15%-0%残糖;

当发酵罐数量为7个时,该七级发酵罐各级罐内糖浓度为:一级:95%-90%残糖;二级:80%-70%残糖;三级:70%-60%残糖;四级:60%-45%残糖;五级:45%-35%残糖;六级:35%-15%残糖;七级:15%-0%残糖。

3.根据权利要求1所述多级连续发酵生产丁二酸的方法,其特征在于:第四步,所述气体为体积比为1:1的CO2和H2的混合气、纯CO或纯N2中的一种,通气量为0.01-0.04L/(min·L)。

4.根据权利要求1所述多级连续发酵生产丁二酸的方法,其特征在于:第四步,一级发酵罐的初糖浓度为50- 150 g/L,各级发酵罐的补糖速率为10-40 ml/h,发酵液流出速率为40-160 ml/h,发酵液流入速率为10-150 ml/h,细胞回流速率10-50 ml/h。

5.根据权利要求1所述多级连续发酵生产丁二酸的方法,其特征在于:碳源补料罐培养液为葡萄糖溶液、蔗糖溶液、淀粉糖化液、糖蜜或木质纤维素水解液中一种。

6.根据权利要求1所述多级连续发酵生产丁二酸的方法,其特征在于:第四步,pH通过加入碳酸钠、碳酸钾、碳酸镁、氢氧化钠、氢氧化钾或氢氧化镁中的一种或多种来调节。

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